丝氨酸/苏氨酸激酶Plk1在食管鳞癌发生发展中的生物学作用及其靶位治疗的研究

Plkl(Polo-like kinase 1)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶， 对细胞周期的正常进行、中心体成熟、胞质分裂等方面均有重要影响。我们的前期研究发现，Plkl在食管鳞癌中呈高表达，以 siRNA瞬时干扰Plkl能抑制食管鳞癌细胞的体外增殖与侵袭。本课题拟在此基础上，应用RNAi技术，构建Plkl基因沉默的稳定的食管鳞癌细胞系，观察Plkl表达下调对食管鳞癌细胞生长增殖、黏附、侵袭和裸鼠体内成瘤能力和肺转移等生物学活性的影响，观察Plkl表达下调对食管鳞癌细胞有丝分裂和凋亡的影响；通过基因芯片技术和Western Blotting 筛选Plkl调节的下游靶蛋白。此研究将有助于阐明Plk1在食管鳞癌发生发展中的作用及分子机理，而且能为以Plk1为靶点的食管鳞癌基因治疗提供新思路和可靠的实验依据，还将为Plk1参与食管鳞癌发生发展分子机制的可持续性研究打下坚实的基础。

PLK1是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，对细胞周期的正常进行、中心体成熟等方面均有重要调控作用。我们通过体内外实验系统研究PLK1在食管鳞癌发生发展中的生物学作用及探讨其作为食管鳞癌基因治疗潜在靶点的可行性，并对PLK1促进食管鳞癌恶性生长和转移的机制做初步探讨。结果：（1）靶向PLK1的siRNA能明显抑制食管鳞癌细胞的体外增殖、迁移与侵袭，能诱导食管鳞癌细胞的凋亡。（2）裸鼠皮下移植瘤模型、裸鼠肺转移模型和斑马鱼围心腔注射模型实验证实PLK1 siRNA的重组慢病毒载体能明显抑制食管鳞癌体内生长与转移。（3）微血管的形成与Caspase-3的表达介导的抗凋亡能力在PLK1调控的食管鳞癌恶性生长中起重要作用。（4）PLK1过表达能抑制β-catenin降解复合物的聚合从而稳定β-catenin，通过调控Wnt/β-catenin信号通路诱导食管鳞癌细胞发生EMT，从而促进食管鳞癌的转移。.结论：PLK1在食管鳞癌的生长与转移中起重要作用，以PLK1为靶点的食管鳞癌基因治疗有一定的可行性。PLK1通过调控食管鳞癌血管生成及Caspase-3介导的抗凋亡能力在食管鳞癌的恶性生长中起重要作用。PLK1通过调控Wnt/β-catenin信号通路诱导食管鳞癌细胞发生EMT，促进食管鳞癌的转移。