补骨脂素/DOX复合SLN制备及抗白血病MDR机制研究

Multidrug resistance is the main reason of recurrence in leukemia treating,Doxorubicin is the kind of anthracycline drug in treating leukemia, Psoralen have the fuction of reversing multidrug resistance, but the nature of psoralen is liposoluble, bioavailability is lower. Solidlipidnanoparticle is a kind of nano preparation producing by matrix material,it can reverse multidrug resistance by the way of durg penetrating blood-brain barrier. In this project, preparing psoralen/ doxorubicin-solidlipidnanoparticle, researching accumulation and efflux of drug in multidrug resistance cell, discusing the possible mechanism in the way of intracelluar dynamics.It will supply the evdience of psoralen/ doxorubicin-solidlipidnanoparticle in reserving multidrug resistance,and providing the true case in design of herb's solidlipidnanoparticle, it will supply evdience in explaing the mechnism of treating leukemia's multidrug resistance.

多药耐药（Multidrug Resistance,MDR）是白血病复发率高预后不良主要原因。阿霉素（Doxorubicin，DOX）是蒽环类抗肿瘤药常用于白血病治疗；补骨脂素（Psoralen，PSO）是天然香豆素类化合物具有逆转MDR作用，但其是脂溶性物质水溶性差，口服生物利用度低；固体脂质纳米粒（Solidlipidnanoparticle，SLN）是采用脂质材料制备的纳米制剂，其可促进化疗药物穿透血脑屏障达到逆转MDR作用。本课题拟制备补骨脂素-阿霉素SLN（PSO/DOX-SLN），就其对白血病MDR细胞内DOX积聚及细胞摄取、外排影响开展研究，从胞内动力学角度探讨抗白血病MDR可能机制。本研究内容将为POS/DOX-SLN抗白血病MDR提供依据，其影响细胞药动学和亚细胞器的分布研究将为中药SLN设计提供新的实证，也为阐述POS/DOX-SLN抗白血病MDR作用机制提供。

多药耐药（Multidrug Resistance, MDR）是许多肿瘤对化疗产生抵抗的主要机制，它也是影响临床各种癌症化疗成功率的主要因素之一。阿霉素（Doxorubicin，DOX）是蒽环类抗肿瘤药常用于白血病治疗；补骨脂素（Psoralen，PSO）是天然香豆素类化合物具有逆转MDR作用，但其是脂溶性物质，水溶性极差，口服生物利用度低；固体脂质纳米粒（Solid lipid nanoparticle，SLN）是采用天然或合成的脂质材料，如硬脂酸、卵磷脂、三酰甘油酯等为基质制备的纳米制剂，具有生物兼容性好，稳定性好，有效控释、避免药物降解和泄漏，多种给药途径等优点，其可促进化疗药物穿透血脑屏障达到逆转MDR作用。本研究确定了中药逆转剂与化疗药复合纳米粒PSO/DOX-SLN的制备方法，并完应用星点设计效应面优化法（CCD-RSM）进行处方优化，确定了工艺参数，并就其体外逆转白血病MDR作用进行了评价。结果显示：以固体脂质Precirol ATO5、GM和液体脂质LABRATAC LIPOPHIE WL1349为载体材料，以大豆卵磷脂、F68和Tween-80为复合乳化剂，采用乳化蒸发-低温固化法制备的PSO/DOX-SLN，理化性质优良，实验还建立了同时PSO和DOX包封率的HPLC检测方法；最优处方为药脂比1：10，磷脂脂质比1.97：1，Tween-80浓度为2.6 %，PSO包封率>70 %，DOX包封率>80 %；体外透析实验显示PSO/DOX-SLN在前5h存在突释情况，整体缓释效果优于PSO/DOX溶液。PSO/DOX-SLN体外对白血病耐药细胞多药耐药的逆转作用，以白血病敏感株K562/S和耐药株K562/DOX为受试细胞，采用MTT法测定PSO/DOX-SLN对耐药细胞敏感性，比较和评价PSO/DOX-SLN逆转白血病细胞MDR作用，结果显示PSO/DOX-SLN逆转倍数是DOX-NLC的2.55倍，以PSO/DOX游离药物为对照，其逆转为数为6.46倍。本课题研究通过将具有逆转MDR作用的中药单体与化疗药物结合，并利用纳米给药体系的优点，制备复合纳米粒，既克服脂溶性药物补骨脂素生物利用度低的问题，又可解决阿霉素药物溶液易使肿瘤细胞产生多药耐药问题，探索出了具有逆转白血病MDR的复方纳米制剂，为其他复合纳米制剂的研制提供实证和模式；建立了其对白血