葛花枳椇子配伍对急性酒精性肝损伤小鼠保护作用的实验研究

Alcoholic liver injury is a global public health problem. If timely measures are taken in the early stage of injury, it can prevent the development of the disease to irreversible lesions, so the prevention and treatment of acute alcoholic liver injury is particularly urgent. But the study is relatively weak now. Nrf2 is an important transcription factor in cell antioxidant stress response,which activate the antioxidant enzymes through Keap1-Nrf2-ARE signaling pathway. It plays an important role in the early stage of alcoholic liver injury. There is no report on the prevention and treatment of acute alcohol induced liver injury by this way. Study have found that the Hovenia dulcis extract can regulate expression of Nrf2.Our previous study have found Flos puerariae combining with Hovenia dulcis Thunb can influence antioxidant enzymes in blood on rats of alcoholic liver injury and improve fat degeneration which showed the Comaptibility has protective effect against alcoholic liver injury. Therefore, the project will make an acute alcoholic liver injury animal mode by alcohol gastric infusion,and then dynamically observe the liver injury, to discuss Flos puerariae combining with Hovenia dulcis Thunb whether can activate Keap1-Nrf2-ARE signaling pathway to induce antioxidant enzyme,enhance endogenous antioxidant capacity against hepatic oxidative stress.Our study also try to combine with the pathogenesis of traditional Chinese medicine to explore whether the protective effect of Flos Puerariae combining with Hovenia Dulcis Thunb on acute alcoholic liver injury is related with AQP9 expression,which can regulate fat metabolism in the liver.Our study maybe provide scientific reference for the clinical use of traditional Chinese medicine.

酒精性肝损伤是全球亟待解决的公共卫生问题之一，早期若能及时防治，可阻止其向不可逆病变发展，故防治急性酒精性肝损伤尤为迫切，但目前相关研究较薄弱。Nrf2是抗氧化应激反应的重要因子，通过Keap1-Nrf2-ARE通路激活下游的抗氧化酶发挥作用，在酒精性肝损伤的早期发挥重要作用，但尚未见到从该通路开展防治急性酒精性肝损伤研究的报道。研究表明，枳椇子提取物可调节Nrf2的表达，我们前期研究发现，葛花枳椇子配伍对慢性酒精性肝损伤大鼠抗氧化酶有一定影响，并能改善脂肪变性，具有保肝作用，故拟进一步开展二者对急性酒精肝损伤的保护研究，采用白酒灌胃复制动物模型，动态观察肝损伤情况，通过生化、病理、分子生物学等技术方法，探讨二者配伍能否激活Keap1-Nrf2-ARE通路诱导抗氧化酶活性而保肝，同时尝试结合中医发病机制，探讨二者能否影响水-甘油通道蛋白AQP9表达而调节肝中脂代谢，为临床用药提供科学依据。

酒精性肝损伤是全球亟待解决的公共卫生问题之一，早期若能及时防治，可阻止其向不可逆病变发展，故防治急性酒精性肝损伤尤为迫切，但目前相关研究较薄弱。Nrf2是抗氧化应激反应的重要因子，通过Keap1-Nrf2-ARE通路激活下游的抗氧化酶发挥作用，在酒精性肝损伤的早期发挥重要作用，但尚未见到从该通路开展防治急性酒精性肝损伤研究的报道。研究表明，枳椇子提取物可调节Nrf2的表达，我们前期研究发现，葛花枳椇子配伍对慢性酒精性肝损伤大鼠抗氧化酶有一定影响，并能改善脂肪变性，具有保肝作用，故本研究采用白酒灌胃复制急性酒精肝损伤动物动物模型，动态观察肝损伤情况，通过研究葛花枳椇子配伍对急性酒精性肝损伤小鼠乙醇代谢，肝功能，血脂，肝组织病理形态，肝中抗氧化酶活性，肝中Keap1、Nrf2和AQP9mRNA和蛋白表达，探讨二者配伍能否激活Keap1-Nrf2-ARE通路诱导抗氧化酶活性而保肝，同时尝试结合中医发病机制，探讨二者能否影响AQP9表达而调节肝中脂代谢。本项目研究结果表明，葛花枳椇子各配伍组（1∶1，1∶2 和2∶1）对酒精诱导的急性肝损伤具有保护作用。首先，通过激活Keap1-Nrf2-ARE信号通路，增强抗氧化酶活性，减轻脂质过氧化作用，改善氧化应激诱导的细胞损伤，从而缓解酒精对小鼠的肝脏损害，发挥保护肝脏的作用。其次，通过调控AQP9的表达，降低甘油的渗透性，减少甘油的摄入，改善肝脏脂质代谢异常，从而缓解酒精诱导的氧化应激和肝脂肪变性，起到保护肝细胞的作用。值得注意的是，葛花枳椇子（2∶1）组在促进酒精代谢，改善肝脏功能，减轻肝脏脂肪变性，提高小鼠抗氧化能力方面显现出积极作用。因此，本研究证实葛花枳椇子配伍对急性酒精性肝损伤显示出一定的防治作用，二者配伍产生相须为用、协同增效的功用，具有增强解酒保肝的效果，为临床应用葛花枳椇子防治急性酒精性肝损伤提供了科学依据。