miR-146a对高糖诱导的内皮氧化损伤的影响及机制

microRNAs involve in the pathogenesis of diabetes and its complications. It has been proved that in vascular endothelial NOX4 is the main resource of ROS which can damage endothelial and result in diabetes vasculopathy.Recent study have shown the level of miR-146 decreased and the express level of its target gene-NOX4 rise in endothelial. Then,we have the hypothesis: decrease of the level of miR-146 in endothelial damaged by oxidative stress regulates the rise of NOX4 accompany with changes such as cell apoptosis and so on. In the present study,we will examin the protective effects of miR-146a on endothlial injury and the mechanism of miR-146a to improve endothelial dysfunction andreduce cell apoptosis in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC)s and rat model of diabetes, using RNA interference, Realtime PCR, Western blot and other methods, from molecules, cells, tissues and animals, and other aspects of the overall level to analyze the role of miR-146a on endothelial cell injury of glucolipotoxicity. This study will explore the role of microRNA in the vascular complications of type 2 diabetes prevention and treatment from a new perspective.

micro RNA参与糖尿病及其并发症的发病过程。NOX4已被证明是血管内皮细胞ROS产生的主要来源，ROS及其引发的内皮细胞损伤是糖尿病血管病变的始动因素。micro RNA参与糖尿病及其并发症的发病过程，研究显示miR-146a可能与NOX4相关。因此，我们提出假说：氧化应激损伤内皮细胞中miR-146a的表达增加，导致NOX4减少，ROS升高和细胞凋亡等变化。本研究拟采用人脐静脉内皮细胞及糖尿病大鼠模型，通过RNA干扰、Realtime PCR 、Western blot等方法，从分子、细胞及整体水平分析miR-146a在内皮细胞氧化损伤中的作用，探讨miR-146a改善内皮细胞功能紊乱，减少细胞凋亡的调控机制，为糖尿病大血管病变提供新视角。

在糖尿病患者中大血管病变的发生率较高，血糖控制不佳与糖尿病血管并发症的发生密切相关。血管内皮细胞（ECs）是附着在血管内表面的单层扁平上皮，容易受到高糖的损伤。因此，探索内皮细胞受损的机制对缓解糖尿病血管并发症至关重要。. 研究发现去乙酰化酶1（Sirt1）在糖尿病血管并发症的发生发展中起着重要作用，其可以通过调控内皮细胞代谢、迁移、老化及存活发挥作用。一些研究发现了sirt1与线粒体分裂之间的关系。sirt1是否可以通过调控线粒体分裂影响糖尿病大血管的病变尚未可知。除了凋亡，内皮细胞迁移功能的下调也是糖尿病血管病变的一个重要的机制。众所周知，F-肌动蛋白的稳态在调控细胞迁移方面起着重要的作用。然而，sirt1是否可以通过调控F-肌动蛋白的稳态来影响内皮细胞的迁移尚未可知。. 我们前期研究发现miR-92a与高糖诱导的内皮损伤相关，并初步探讨了其相关机制。在此基础上我们探讨sirt1在修复糖尿病血管病变中的机制，研究主要方向集中于线粒体分裂和细胞迁移。体内实验及体外实验研究发现，糖尿病小鼠主动脉及高糖刺激下的内皮细胞其sirt1表达均下调，sirt1表达下调与糖代谢异常、动脉内皮功能紊乱、内皮细胞凋亡相关。另一方面，sirt1下调可通过JNK/Mff通路引起线粒体分裂，从而导致内皮细胞凋亡。此外，sirt1的下调可通过影响F-肌红蛋白的稳态影响内皮细胞的迁移。而上调sirt1的表达可通过抑制JNK/Mff线粒体分裂通路、维持F-肌红蛋白的稳态来抑制内皮细胞的凋亡。. 我们得出的结论：sirt1作为一种保护因子，可通过抑制JNK/Mff线粒体分裂通路、维持F-肌红蛋白来保护内皮细胞，从而延缓糖尿病血管并发症的发生。