基于肝X受体表达探讨丹红注射液保护血管内皮功能的机制研究

It is confirmed that Danhong injection could protect endothelial function , stabilize atherosclerosis, decreas serum lipids and inhibit inflammatory response.But there is no exact study to clear the mechanism of Danhong injection in protecting vascula endothelial function.The liver X receptor is the nucleus receptors which is involved in a variety of physiological activities, including the metabolism and transportation of cholesterol,the formation of fat and gluconeogenes, inhibition of inflammatory response and ET-1 transcriptional activity of the promoter.It was not relevant reports about Mechanism of Danhong injection in protecting vascula endothelial function based on the liver x receptor .Thus,the study is aimed at by building rabbits model of atherosclerosis, Clarifying the relationship between liver X receptor and endothelial function with detecting the expression of liver X receptor and endothelial function.Then,we are going to use Danhong injection to treat the rabbit model of atherosclerosis,detecting the expression and liver X receptor as the starting point to evaluate the efficacy of protecting endothelial function by Danhong injection.we hope that the project will provide a new targeted basis for intervention to atherosclerosis.

前期研究表明丹红注射液具有保护内皮功能、稳定动脉粥样硬化、降脂、抗炎等作用，但具体作用机制尚未清楚。肝x受体是具有调控脂质代谢、糖原异生和炎症等作用的核受体，并且能抑制ET-1的启动子的转录活性。ET-1是强烈的缩血管因子。而丹红注射液是否通过调控肝x受体表达以改善内皮功能未见报道。因此本研究通过制备家兔动脉粥样硬化模型，检测肝x受体表达及内皮功能的变化，以期阐明肝x受体与内皮功能的关系；同时应用丹红注射液干预，以肝x受体为切入点，从分子水平探讨丹红注射液保护血管内皮功能的机制，为中医干预动脉粥样硬化提供新的靶向治疗依据。

目的：本研究通过制备家兔动脉粥样硬化模型，检测肝x受体表达及内皮功能的变化，以期阐明肝x受体与内皮功能的关系；同时应用丹红注射液干预，以肝x受体为切入点，从分子水平探讨丹红注射液保护血管内皮功能的机制，为中医干预急性心肌梗死提供新的靶向治疗依据。方法：140只健康雄性新西兰兔子随机分为实验一[对照组（n=20），模型组（n=20）]和实验二[对照组（n=20）、阿托伐他汀组(n=20)、丹红高剂量组（n=20）、丹红中剂量组（n=20）、丹红低剂量组（n=20）]。除对照组外，所有家兔均采用喂饲高胆固醇饲料联合注射牛血清白蛋白的方法，建立AS 模型，模型组给予高脂饮食，他汀组给予0.1mg/ml的阿托伐他汀[5mg/（kg·d)]；丹红高、中、低剂量组分别给予肌注丹红注射液[0.6、0.3、0.15ml/（kg·d）]。在第1周和第8周取材，采血、分离肝脏和左髂外动脉。运用酶法检测各组家兔血浆一氧化氮（NO）、血管性血友病因子（vWF）、内皮素-1(ET-1)；实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组家兔肝脏肝x受体α（LXRα）和肝x受体β（LXRβ）；彩超检测血管内皮舒张功能；组织形态学分析各组家兔左侧髂外动脉AS斑块形成情况。结果：实验一发现模型组第8周TC、LDL-C、TG、vWF、ET-1、LXRαmRNA较对照组明显升高（P<0.05），NO明显降低（P<0.05），模型组形成动脉粥样硬化斑块。实验二发现丹红高剂量、中剂量、低剂量组TC、TG、LDL-C、vWF、LXRαmRNA水平较对照组升高（P<0.05），NO水平降低（P<0.05），丹红中剂量组ET-1较对照组升高（P<0.05）。他汀组、丹红高剂量、中剂量、低剂量组动脉斑块硬化病理变化较血管硬化变化较对照组有变化，对比模型组减轻。结论：应用高脂饲养联合静脉注射小牛血清白蛋白方法能够成功构建动脉粥样硬化家兔模；LXRαmRNA表达升高进而调节血管内皮功能可能是一种改善动脉粥样硬化的代偿调节机制；丹红注射液能够改善实验性动脉粥样硬化家兔的血管内皮功能，抑制内皮功能障碍的进展，保护血管舒张功能，可能与调控肝脏LXRαmRNA的表达有关。