青藤碱修饰供体树突状细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受及相关机制研究

Dendritic cell plays a vital role in transplantation rejection. It may be an important approach to avoiding organ transplant rejection by utilizing immature dendritic cell (imDC) to induce donor-specific immunologic tolerance. Based on the previous relevant studies, this project plans to identify imDC derived from inducing in vitro donor-derived bone marrow in renal transplantation in rats with the combination of granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF), interleukin-4 and Sinomenine (SIN). The identification is carried out in such aspects as shape, phenotype and immunostimulating effect. The project then discusses the mechanism of imDC induced by Sinomenine. On the basis of the preliminary discussion, it establishes a model of different tissue matching in renal transplantation in rats and conducts a test of inducing immunologic tolerance in renal transplantation in rats with imDC receptor modified by Sinomenine (SIN). It aims to clarify the action mechanism of Sinomenine (SIN) in transplantation rejection, which provides a reliable experimental evidence for applying it in renal transplantation in clinical worko

树突状细胞在移植排斥反应过程中起着至关键性的作用,利用未成熟树突状细胞(immature dendritic cell，imDC)诱导供体特异性免疫耐受有可能成为防治器官移植排斥反应的重要途径，本项目拟在前期相关研究的基础上通过粒-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4结合青藤碱体外诱导大鼠肾脏移植供体骨髓来源的imDC；从imDC形态、细胞表型和免疫刺激活性加以鉴定；并就青藤碱诱导imDC相关机制进行初步探讨；在此基础上建立组织配型不相同大鼠肾脏移植模型，进行青藤碱修饰的受体来源imDC诱导大鼠肾移植免疫耐受实验。旨在明确青藤碱抗移植排斥反应作用机制，为其在肾移植临床应用提供可靠的实验依据。

树突状细胞在移植排斥反应过程中起着至关键性的作用,利用未成熟树突状细胞(immature dendritic cell，imDC)诱导供体特异性免疫耐受有望成为防治器官移植排斥反应的重要途径。本项目通过粒-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-4结合青藤碱体外诱导大鼠肾脏移植供体骨髓来源的imDC；从imDC形态、细胞表型和免疫刺激活性加以鉴定；并就青藤碱诱导imDC相关机制进行初步探讨；在此基础上建立组织配型不相同大鼠肾脏移植模型，进行青藤碱修饰的受体来源imDC诱导大鼠肾移植免疫耐受实验。.结果显示：1. 联合应用GM-CSF+IL-4可体外诱导出高纯度、数量多的DC；通过免疫磁珠纯化可获得相对数量多、纯度高的DC以满足实验需要。2. 青藤碱能抑制DC进一步成熟；随着剂量的增加青藤碱对DC成熟的抑制作用增强。3. 青藤碱可以显著抑制树突状细胞TLRs表达及ERK1/2、p38MAPK、JNK的磷酸化，提示青藤碱可能可以通过抑制TLRs及MAPK信号通路抑制DCs成熟，从而诱导免疫耐受。4.利用显微外科血管吻合法成功的建立起了大鼠单肾移植模型，可以满足后续实验的进行。5.青藤碱诱导的特异性imDC可使受体大鼠体内Th2细胞因子显著上调、Th1细胞因子明显下调，诱导了向Th2型免疫应答的偏移，表明由青藤碱诱导的imDC可能可以介导受体发生免疫耐受。6. imDC 可能具有免疫耐受诱导作用至少是移植肾脏功能保护作用；SN-imDC的免疫耐受诱导作用或者是移植肾脏功能保护作用优于imDC；组织病理学及排斥反应标志物可以证实imDC与SN-imDC的保护作用的存在。.本项目初步明确青藤碱抗移植排斥反应作用机制，为其在肾移植临床应用提供可靠的实验依据。