桑树抗冻蛋白基因的表达及功能研究

对已克隆的桑树抗冻蛋白基因进行功能分析，阐明基因序列的结构特征及其与功能的关系。对所获基因进行原核表达（大肠杆菌BL21/pGEX4T-2），表达产物纯化后对乳酸脱氢酶进行冷冻活性检测和制备抗体；利用Western blotting检测技术和免疫胶体金标记技术对桑树抗冻蛋白进行定位及功能验证；采用Northern杂交技术分析抗冻蛋白基因在不同株系不同诱导条件下的表达；用农杆菌介导法对优质丰产但抗冻性弱的桑树品种进行遗传转化，筛选抗冻性强的新株系。本项目不仅研究桑树抗冻蛋白基因的生理功能、细胞定位及遗传转化，对促进桑树基因改良和分子育种的实用化具有积极作用，而且为进一步探明植物抗冷抗冻特性和低温应答机制具有重要意义。