尤文肉瘤EWS-Fli1融合蛋白对E2F1基因表达及p53功能调控机制的研究

尤文肉瘤是好发于青少年的恶性骨肿瘤，其恶性度高，发展迅速，预后不良。深入探讨其发病机制，建立新的治疗策略，已成为迫在眉睫的课题。目前研究表明，EWS-Fli1融合基因是诱发细胞无限增殖，促使尤文肉瘤发生发展的致癌基因。前期研究发现，EWS-Fli1可以转录激活细胞周期G1/S期最终执行因子E2F1的表达，加速细胞周期进程，而EWS-Fli1亦可能通过与促细胞凋亡蛋白p53的结合作用，抑制其对下游靶基因的转录激活效应，导致肿瘤细胞无限增殖。本次立项研究拟采用转录因子活性分析法进一步探讨EWS-Fli1对E2F1的调控机制，并采用蛋白质相互作用分析法、转录因子活性分析法、及细胞凋亡诱导分析法进一步研究EWS-Fli1抑制p53功能的具体机制，同时还将尝试据此而选用的新分子靶向治疗药物对尤文肉瘤细胞增殖的抑制效果。该研究有望在尤文肉瘤的病因学研究以及由此而引发的药物开发研究方面开辟一片新的视野。

尤文肉瘤是好发于青少年的恶性骨肿瘤，其恶性度高，发展迅速，预后不良。深入探讨其发病机制，建立新的治疗策略，已成为迫在眉睫的课题。目前研究表明，EWS-Fli1融合基因是诱发细胞无限增殖，促使尤文肉瘤发生发展的致癌基因。前期研究发现，EWS-Fli1可以转录激活细胞周期G1/S期最终执行因子E2F1的表达，加速细胞周期进程，而EWS-Fli1亦可能通过与促细胞凋亡蛋白p53的结合作用，抑制其对下游靶基因的转录激活效应，导致肿瘤细胞无限增殖。本研究在前述结果基础上取得如下进展: （1）EWS-Fli1可在启动子水平转录激活E2F1基因表达。（2）应用针对E2F1的引诱物法，及细胞周期蛋白酶抑制剂对尤文肉瘤细胞的体外及体内抑制试验均取得了较为满意的结果。（3）EWS-Fli1融合蛋白可以通过结合p53蛋白抑制p53途径功能,并且这个结果可能是由于EWS-Fli1与HDAC1结合，通过下调p53-Lys-382残基的乙酰化水平，进而抑制p53的翻译后修饰从而介导的p53转录活性和蛋白稳定性下降所致。上述机制的进一步研究有助于更好的诠释异常融合基因EWS-Fli1的表达对细胞周期G1-S期调控平衡的破坏从而促进尤文氏肉瘤发生发展这一理论，而基于该机制研究所尝试的CDKI及HDACI等分子靶向药物的应用有可能成为尤文肉瘤治疗的新方法。