二陈汤干预转移性肺癌内皮细胞粘附分子-1表达的机制研究

以二陈汤为代表的中医化痰治疗在控制肺癌转移的临床治疗中取得了可靠的疗效，但二陈汤干预肺癌转移的具体作用机制尚未十分明确。我们在临床和基础研究中发现，二陈汤至少是可能通过有效抑制内皮细胞粘附分子-1（ICAM-1）表达这一途径，而达到控制肺癌转移的目的。现有研究则表明，细胞内信号通路在ICAM-1的调控上发挥了重要的作用。因此，我们拟使用二陈汤对LPS诱导高转移性人肺癌细胞（PG）ICAM-1高表达模型和荷PG裸鼠模型进行干预，在核酸和蛋白质水平上抑制ICAM-1表达，探讨二陈汤抑制ICAM-1表达是否是通过干预JNK、p38等细胞内信号通路而实现的，从而明确二陈汤干预肺癌转移时ICAM-1表达的机制。

本课题围绕中医的二陈汤抑制肺癌细胞转移的疗效及机制进行了相关研究，达到了本课题的研究目的，明确了二陈汤可抑制肺癌组织与细胞的增殖，其机制与抑制ICAM-1表达相关，其可能的通路为抑制了MAPK通路的JNK及p38通路。本课题发表了3篇文章（一篇已录用），其中SCI论文一篇。.二陈汤作为化痰的代表方,流传至今，肺癌的主要中医证候之一是痰证，根据中医辨证论治理论，二陈汤可作为肺癌治疗的基础方使用，但是，二陈汤治疗肺癌的机制尚待研究。细胞粘附分子-1（cell adhesion molecules-1, ICAM-1）的表达在肺癌的诊断、病程进展、转移潜能与预后判断方面有很大的价值，可作为肿瘤的标记物，由于ICAM-1与MAPK通路密切相关，p38及JNK是MAPK通路的常见下游通路，因此，在确定了二陈汤抑制ICAM-1表达之后，我们研究了其中的机制。.体外实验中，我们观察了二陈汤对PG-BE1及A549肺癌细胞的影响。MTT法显示，二陈汤可抑制PG-BE1细胞的增殖，其作用具有时间与剂量依赖性。通过流式细胞仪检测我们明确了二陈汤作用的细胞周期主要为S期，二陈汤可抑制PG-BE1细胞膜的ICAM-1表达，其作用具有时间与浓度依赖性。我们以PCR及western-blot法检测了二陈汤对TNF-α及LPS诱导的PG-BE1细胞株ICAM-1mRNA 以及p-JNK及p-p38高表达的影响，结果显示，二陈汤可抑制三者的表达。以同样的方法检测了二陈汤对TNF-α诱发的A549细胞株ICAM-1mRNA 以及p-p38表达的影响，结果显示，二陈汤可抑制A549细胞株的ICAM-1 mRNA及p-p38表达。以上研究显示，二陈汤具有抑制肺癌细胞增殖的作用，其作用与抑制ICAM-1的表达相关，二陈汤可通过影响MAPK通路的JNK及p38通路而干预ICAM-1表达。.在体内实验中，我们将二陈汤治疗组分为两个剂量组观察，结果提示，二陈汤小剂量组可抑制肿瘤增殖，其疗效高于顺铂、对照组及大剂量组，顺铂与大剂量二陈汤联合应用时疗效优于二者单独应用，这个结果提示，顺铂与二陈汤可能存在协同作用。体内实验也验证了二陈汤可通过抑制JNK及p38的表达影响ICAM-1表达。.以上研究结果提示，中医辨证论治理论指导下使用的中药二陈汤确实在治疗肺癌方面有疗效，有进一步深入研究的价值和意义。