运用鸭乙肝合并脂肪肝模型评价中药降脂提高抗病毒治疗应答的研究

乙型肝炎合并肝脂肪变的患病率逐年上升，肝脂肪变可影响乙型肝炎的发生、发展和治疗转归。肝脂肪变是影响抗病毒治疗的病毒应答的重要因素。改善肝脂肪变能够提高抗病毒药物的病毒应答率。中药在治疗非酒精性脂肪肝（NAFLD）方面有一定的优势。.本课题通过建立鸭乙肝合并NAFLD动物模型，检测血清生化指标ALT、AST、TG、TC、GLU以及血清和肝组织DHBV DNA滴度，以及肝脏病理组织学观测，探讨：（1）与单纯鸭乙肝无脂肪肝组比较，观察肝脂肪变与鸭乙肝的DHBV DNA载量的相关性；（2）对单纯鸭乙肝无脂肪肝组抗病毒与鸭乙肝合并脂肪肝组抗病毒治疗对比，观察肝脂肪变对抗病毒治疗病毒应答的影响；（3）单用抗病毒药与中药降脂联合抗病毒药治疗鸭乙肝合并脂肪肝，比较两者的病毒应答，阐明中药降脂能够改善肝脂肪变，达到提高病毒应答率的目的。

1.本项目首先建立慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪肝动物模型。筛选16只先天感染鸭乙肝病毒（DHBV）的雏麻鸭饲养至3周龄，随机分为对照组和模型组，每组8只，分别予普通饲料及填饲高糖高脂饲料3周，并于在造模前、造模2周、造模3周分别观察鸭体重，血糖、血脂、转氨酶等生化指标、DHBV DNA载量的变化，同时造模结束后观察肝脏病理形态学变化和肝指数。结果模型组鸭血糖（Glu）、血清总胆固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）（P<0.01）均高于对照组，且造模后各项指标明显高于造模前（P<0.01），模型组肝组织病理可见大量肝细胞脂肪变性。表明成功建立乙肝合并非酒精性脂肪肝动物模型,为今后研究乙肝合并非酒精性脂肪肝提供了合适的动物模型。.2. 观察慢性乙型肝炎(CHB)合并非酒精性脂肪性肝炎（NASH）中药降脂对抗病毒治疗后血清和肝组织内HBV DNA载量的影响。采用先天感染DHBV的广东麻鸭并高糖高脂饲料填饲，建立鸭乙肝合并非酒精性脂肪性肝炎模型。实验共分为9组，模型组：恩替卡韦+壳脂胶囊高（M1）、中（M2）、低剂量组（M3），壳脂胶囊高（M4）、中（M5）、低剂量组（M6）及恩替卡韦模型组（M7）；对照组：病毒对照组 (D1)，恩替卡韦对照组 (D2)。模型组分别采用恩替卡韦+壳脂胶囊、单用壳脂胶囊和单用恩替卡韦治疗，对照组分别用生理盐水和恩替卡韦治疗，治疗21d。分别于给药前（T0）、21d(T21)检测血清ALT、AST、γ-GT、ALP等肝功能指标以及TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu等糖脂代谢指标，荧光定量PCR检测血清DHBV DNA；检测肝内TC、TG和肝组织内DHBV DNA以及肝组织病理学检查。治疗后恩替卡韦+壳脂胶囊组（M1、M2、M3）与恩替卡韦模型组（M7）比较，无论血清DHBV DNA还是肝内DHBV DNA均有显著差别（P<0.05或P<0.01）；恩替卡韦对照组（D2）与恩替卡韦模型组（M7）比较，抗病毒效果有显著差别（P<0.01）；肝脏组织病理学检查显示，恩替卡韦联合壳脂胶囊抗病毒、降脂治疗后，肝脏炎症及脂肪变程度较病毒对照组明显减轻。实验结果表明中药降脂治疗后能改善肝脂肪变，提高抗病毒应答率。