诱导胚胎干细胞分化为小肠上皮细胞

各种原因引起的小肠上皮形态和功能受损，导致严重的消化吸收不良；以及迁延不愈的肠瘘和Crohn's病是内外科临床面临的棘手问题。本课题首先在已经初步分离胎鼠小肠上皮干细胞和体外培养、诱导鼠E14胚胎干细胞（ESC）分化的基础上，以小肠上皮发育生物学的研究进展为依据，用不同的诱导方案体外诱导鼠E14 ESC 向小肠上皮细胞分化，建立最优化的诱导分化体系。分析诱导分化过程中细胞表型与核型的变化，并在体外培养和Scid鼠体内移植鉴定其生物学特征、功能和安全性，证明诱导的细胞具有小肠上皮细胞的特性。将诱导细胞移植到经致死性放射剂量照射的雌性鼠体内，通过原位杂交和荧光示踪技术等确定移植细胞能否定位于病损小肠粘膜及其体内增殖能力，并且观察移植细胞重建受损的小肠粘膜和治疗小肠瘘、Crohn's病的疗效。为大量获取小肠上皮细胞进行小肠上皮细胞移植的实验与临床研究提供技术支持和供体来源。