以犬腺病毒为基础的抗原表位展示技术的建立及相关特征研究

在重组腺病毒复制非必需区内插入的外源基因只能以非结构蛋白的形式进行分泌表达，而且一个复制循环只能产生一个或几个拷贝的外源性抗原分子，因此，目前重组腺病毒诱导的针对外源抗原的免疫应答水平不象完整病毒颗粒那样高，这是限制重组腺病毒应用的主要原因之一。本项目拟在前期获得感染性犬腺病毒基因组的基础上，通过克隆和重组技术，对犬腺病毒的Ⅱ（六邻粒）、Ⅲ（五邻粒）或Ⅳ（纤突）蛋白的基因进行亚克隆，再通过突变、缺失、插入抗原表位（狂犬病病毒糖蛋白中和线性表位）编码序列、再以重组和转染技术，分别确定三种蛋白中可以插入外源性抗原表位，但不影响病毒复制和装配的基因区域，并通过单克隆抗体鉴定外源抗原表位的反应原性，通过动物免疫鉴定外源抗原表位的免疫原性。为建立一种通用的腺病毒抗原表位展示技术，发展多抗原表位展示性重组疫苗奠定基础。