本项目首先应用电生理学方法在同一个伏核神经细胞上分别微电泳CCK-B和阿片受体激动剂,从功能上确定伏核神经细胞有CCK-B受体和阿片受体共存;应用免疫荧光细胞化学和激光共聚焦方法从形态上证实伏核神经细胞上有CCK-B受体和阿片受体共存。研究伏核内确定哪种阿片受体参与痛觉的调节,CCK与哪种阿片受体有相互作用。项目还将在HEK293细胞内转染CCK-B受体和阿片受体的质粒,使之表达CCK-B受体和阿片受体,通过免疫荧光细胞化学和激光共聚焦方法观察CCK-B受体激动剂对阿片受体内化的影响。为了确定伏核神经细胞的CCK-B受体和阿片受体之间存在直接相互作用还是通过某些蛋白分子间接作用,项目应用分子生物学方法建立酵母双杂交系统,分别筛选与CCK-B受体和阿片受体相互作用的蛋白,然后确定是否存在与CCK-B受体和阿片受体都作用的蛋白。以上研究结果将从分子和细胞水平阐明中枢内CCK 抗阿片的神经机制。
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数据更新时间:2023-05-31
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