ChIP-chip技术及鼠疫耶尔森氏菌毒力调控子CRP的研究

本研究假设：调控子CRP通过调控特定靶基因的转录上调和下调，控制着鼠疫菌的宿主适应力和致病力。主要研究内容和目标：在系统分析鼠疫菌crp突变株的毒力表型的基础上，采用DNA芯片表达谱分析技术和ChIP-chip实验技术，从全基因组水平上筛选和鉴定CRP靶基因，鉴定CRP调控元；进而运用凝胶阻滞实验技术，鉴定CRP直接调控的靶基因；选择若干关键毒力相关基因，采用lacZ融合报告基因技术、DNA酶I足迹实验技术、引物延伸实验技术，深入研究CRP是如何直接调控这些基因的转录和表达；将毒力表型和分子实验数据结合起来，认识CRP如何通过激活或抑制特定基因的表达，控制着鼠疫菌的宿主适应力和致病力。