微乳液毛细管电动色谱-复合高盐富集高通量检测痕量中药有效成分的技术研究

Based on the development of new microemulsion system and the innovation of online concentration techniques, high throughput and sensitive methods using microemulsion electrokinetic chromatography - multiple high salt concentration are proposed for quality control of traditional chinese medicine (TCM). Microemulsion electrokinetic chromatography (MEEKC)，which offers the possibility of highly efficient separation of both charged and neutral solutes covering a wide range of water solubility, can be developed for high throughput analysis of active components of TCM in complex real sample. Normal online concentration (i.e., field amplified sample injection, sweeping and anion/cation-selective exhaustive injection sweeping) have been successfully used in MEEKC to increase the detection sensitivity, but it is hard to apply in real sample."Multiple high salt concentration technique"- - combination of normal online concentration and high salt online concentration (i.e., acetonitrile stacking and inter-action between analytes and micellar) is proposed for this technological bottleneck. Methods based on microemulsion electrokinetic chromatography coupling with multiple high salt concentration technique would be used for high throughput determination of trace active components of TCM. 3-6 SCI papers would be published in this project.

从新微乳体系开发和在线富集技术创新着手，致力于微乳液毛细管电动色谱-复合高盐富集高通量灵敏分离检测技术的创新研究。将具有可同时分离水溶性、脂溶性、带电或不带电的物质的微乳液毛细管电动色谱作为中药质量控制的分离技术，通过新微乳体系的开发实现对多种中药有效成分的高通量分离。将常规在线富集技术（如场放大样品堆积法、扫集法和阴/阳离子选择性耗尽扫集法等）和高盐富集技术（如乙腈法和胶束反应法等）进行有机组合，创新建立"复合高盐富集技术"，构建集微乳液毛细管电动色谱高效分离和复合高盐富集技术高灵敏度为一体的新型微乳液毛细管电动色谱分离模式，解决常规在线富集技术虽可提高检测灵敏度，但在实际应用中存在很大局限性的技术瓶颈，实现复杂样品体系中痕量中药有效成分的高通量快速检测。拟发表SCI论文3-6篇。

项目从新微乳体系和在线富集技术创新着手，开发了分离雷公藤中的二萜类和生物碱类成分、栝楼桂枝颗粒中的有效成分等新微乳体系，并开展在线富集联用技术研究以提高其检测灵敏度，建立了适用于中药有效成分分析的微乳液毛细管电动色谱（MEEKC）-在线富集新方法。相关成果已在Analytical Methods和分析化学等期刊发表论文8篇，获得国家发明专利1项，培养硕士2名，研究成果良好。.课题完成的主要内容如下：.1.中药有效成分MEEKC-在线富集新方法研究，为复杂样品体系中痕量中药有效成分检测提供关键技术：例如建立MEEKC结合大体积样品堆积技术同时测定和在线富集5种倍半萜类生物碱的新方法； 建立同时分离检测栝楼桂枝颗粒中甘草苷、甘草素、肉桂酸、没食子酸、原儿茶酸等5种成分的MEEKC结合大体积样品堆积新方法；建立同时分离测定雷公藤甲素和雷公藤内酯酮的MEEKC新方法。.2.中药有效成分毛细管电泳其他分离模式新方法研究：例如建立混合胶束毛细管电动色谱法（MEKC）测定片仔癀中的五种有效成分；建立同时分离检测橙皮苷和柚皮苷对映体的MEKC新方法。建立分离检测延胡索乙素对映体的MEKC-乙腈-场放大新方法。.3.所建立的MEEKC和毛细管电泳其他分离模式法的应用研究：例如所建立的MEEKC可应用于复杂样品体系（如雷公藤及其制剂、滑膜细胞）中雷公藤二萜类和生物碱类成分的测定，用于栝楼桂枝颗粒中有效成分的测定；所建立的MEKC可用于片仔癀中有效成分的测定，用于胃苏颗粒中橙皮苷和柚皮苷对映体的测定。.综合上述，MEEKC-在线富集技术简单、快速、分离效果好且灵敏度高，适合用于复杂样品体系（如中药材及其制剂、细胞等生物样品）中中药有效成分的测定。