血浆microRNA分析用于结直肠癌诊断及预后的研究

最近研究提示血循环microRNA是一类潜力巨大的新分子标志物。我们前期工作证实基因芯片可用于微量血浆标本的microRNA表达谱分析，且该分析可高效鉴别CRC患者。本项目拟用microRNA芯片进一步比较CRC患者与正常对照者的血浆microRNA表达谱式，并验证癌组织与对应血浆microRNA模式的一致性，初步筛选在CRC中差异表达的microRNA靶点；建立精确定量血浆microRNA的荧光RT-PCR技术，运用该技术从上述初筛靶点中筛选出具高诊断价值的血浆microRNA靶点。并建立CRC的异常癌组织/血浆microRNA模式与生存预后的Cox回归模型，以筛查出与生存预后有关的microRNA靶点，建立基于异常组织/血浆microRNA模式的分子分型，为血浆循环microRNA在CRC的早期诊断、分子分型和预后评估中的临床应用奠定基础。

结直肠癌（CRC）是最常见的恶性肿瘤之一。microRNA（miRNA）是一大类参与基因转录后调控的非编码小分子RNA，与肿瘤的发生、发展密切相关。本项目在前期表达谱芯片研究基础上，进一步运用定量PCR技术对其中差异表达的miRNA靶点在独立样本组中进行验证。结果显示，CRC组及进展期腺瘤组血浆miR-29a和miR-92a水平均显著上调。ROC曲线分析显示，血浆miR-29a和miR-92a诊断CRC的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.844和0.838，诊断进展期腺瘤的AUC分别为0.769和0.749。联合这两个靶点诊断CRC的AUC为0.883，敏感度和特异度分别为83.0% 和84.7%，诊断进展期腺瘤的AUC为0.773，敏感度和特异度分别为73.0% 和79.7%。.此外，我们还发现与正常对照组相比，CRC组及进展期腺瘤组血浆miR-601和miR-760水平均显著下调(P<0.001)。ROC曲线分析显示，血浆miR-601和miR-760诊断CRC的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.747和0.788，诊断进展期腺瘤的AUC分别为0.638和0.682。联合这两个靶点诊断CRC的AUC为0.792，敏感性和特异性分别为83.3%和69.1%；诊断进展期腺瘤的AUC为0.683，敏感性和特异性分别为72.1%和62.1%。 另外，与仅运用癌胚抗原（CEA）相比，补充检测miR-601和miR-760后，可以将I 、II 期结直肠癌的检出率从27.5% 提高至 86.3%。因此，血浆miR-29a/miR-92a及miR-601/miR-760是潜在的CRC诊断分子标志物，血浆miRNA分析有可能发展成为一种新的非侵入性CRC早期诊断方法。