肝癌Chk1/SYK(L)通路与靶向治疗

在连续两个与SYK(L)基因相关的国家自然科学基金资助下，研究发现：肝癌中SYK(L)发挥潜在抑癌基因功能，是肝癌切除术后的独立预后因素之一；肝癌中Chk1蛋白表达增高，且与肝癌肝内转移特性相关；Chk1通过磷酸化SYK(L)第295位点的丝氨酸，降低肝癌细胞SYK(L)蛋白的表达。预实验发现：Chk1抑制剂可抑制肝癌细胞增殖与侵袭，其抑制率与肿瘤细胞的SYK(L)表达水平有关。本研究拟通过泛素化实验、RNA干扰、定点突变、构建病毒感染的稳定细胞株、裸鼠皮下及肝脏原位移植瘤模型等方法，进一步探讨Chk1调控SYK(L)表达的分子机制，以及Chk1抑制剂靶向Chk1/SYK(L)通路对肝癌增殖与转移的影响，阐明Chk1作为肝癌靶点治疗的可能性。本研究结果将有助于为肝癌发病机制和靶向治疗的研究提供新的理论依据。

全长型的脾酪氨酸激酶SYK(L)由于在转录过程中的选择性拼接，翻译产生一种在Interdomain B功能域上缺失23个氨基酸的异构体蛋白，称之为SYK(S)。文献资料分析提示：SYK(L)中特有，而SYK(S)缺失的23个氨基酸中存在Chk1的磷酸化基序。本研究发现：Chk1可以调节SYK(L)蛋白的表达，而对SYK(S)蛋白表达无明显影响；Chk1通过磷酸化SYK(L)第295位点的丝氨酸，启动泛素—蛋白酶体途径降解SYK(L)蛋白。突变子SYK(L)-S295A较其野生型SYK(L)-WT具有更好的抑制肿瘤细胞增殖、克隆形成、侵袭以及肿瘤形成能力。肝癌组织Chk1高表达与患者不良预后相关；162例肝癌组织中Chk1蛋白与SYK(L)蛋白两者表达呈负相关(P < 0.001)。Chk1抑制剂GÖ6976通过抑制Chk1激酶活性，避免SYK(L)蛋白降解；GÖ6976可以抑制肝癌细胞增殖、皮下移植瘤生长，其抑瘤效率与肿瘤细胞SYK(L)表达状态相关；GÖ6976联合化疗药Cisplatin可以提高抗肿瘤疗效。因此，肝癌中Chk1可以调控SYK(L)表达；肝癌SYK(L)作为Chk1的磷酸化底物，通过泛素—蛋白酶体途径，SYK(L)蛋白被降解；靶向肝癌Chk1/SYK(L)通路具有一定的治疗价值。