γD晶状体蛋白下游关键靶蛋白的筛查及其生物学功能的初步研究

本项目拟在前期的遗传性先天性白内障疾病相关候选基因定位和克隆研究工作的基础上，对γD晶状体蛋白基因（CRYGD）进行基因功能研究。以野生型和突变型γD晶状体蛋白为诱饵蛋白，应用酵母双杂交系统对正常人晶状体上皮细胞的cDNA文库进行大规模筛选、比对和验证，寻找CRYGD的下游关键靶蛋白，并运用免疫荧光、Wersten blot、基因芯片等方法探讨CRYGD下游关键靶蛋白对晶状体细胞形态学、细胞内其它蛋白含量和分布的改变、蛋白分子折叠和理化性征特点，以及其对晶状体细胞信号传导途径的影响，以阐明CRYGD突变引起晶状体混浊的相关分子事件，为进一步研究晶状体混浊发生发展的分子机制提供良好的实验支撑平台。该项目的顺利实施可明确白内障疾病相关候选基因CRYGD下游关键靶蛋白及其蛋白质联系网络，可以确定更有效、专一的药物筛选靶目标或多位点联合抑制模式，为寻找基因治疗靶点和研发新的治疗手段打下基础。