艾灸促进快速老化小鼠海马神经发生的microRNA分子网络整合机制研究

本项目在中医针灸理论指导下，基于针灸作用的整体性、综合性作用特点，结合机体生物事件的网络调控研究前沿，在明确艾灸促进海马神经发生效应基础上，避开从单个基因或蛋白以及基因组、蛋白组、转录组和代谢组学等途径切入研究，而是基于前期国家自然科学基金重大研究计划课题研究中新的发现，围绕"microRNA网络调控是艾灸促进海马神经发生的重要作用机制"工作假说，以快速老化小鼠为研究载体，以microRNA网络调控为研究切入点，结合行为学评价、荧光标记、生物信息学预测与分子生物学验证及生物芯片技术、生物信息学数据分析技术中的microRNA-microRNA-NET、microRNA-gene-NET、microRNA-Go-NET等microRNA网络调控分析方法，揭示microRNA网络调控在艾灸促进快速老化小鼠海马神经发生中的作用，阐释艾灸促进海马神经发生的科学原理。

基于中医“脑为髓海”理论，采用“百会”穴艾灸干预的方法，以SAMP8快速老化小鼠为研究对象，从系统生物学的角度，整合行为学评价、神经发生标记、生物信息学预测与分子生物学验证及生物芯片技术、生物信息学数据分析技术中的microRNA-microRNA-NET、microRNA-gene-NET、microRNA-Go-NET 等microRNA 网络调控分析方法研究microRNA 网络调控在艾灸促进快速老化小鼠海马神经发生中的作用。研究结果表明：（1）“百会”穴艾灸可改善SAMP8快速老化小鼠学习记忆能力；（2）“百会”穴艾灸可促进SAMP8小鼠海马神经发生；（3）“百会”穴艾灸主要影响快速老化小鼠SAMP8海马神经发生基因Apaf1、Dclk1、Efnb1、Epm2a、Gli3、Nrxn3、Reln表达；（4）“百会”穴艾灸主要影响快速老化小鼠SAMP海马miR-190、miR-715、miR-323-5p、miR-712*、miR-126-5p、miR-879*、miR-M1-2、miR-10b、miR-367、miR-450a-3p和miR-M1-7-5p microRNA的表达；（5）“百会”穴艾灸可能通过影响核心mircoRNA（mmu-miR-466d-5p、mmu-miR-590-3p、mmu-miR-297b-3p）和核心基因（Dcx、Dclk1、Pten、Crebl、Sema3a、Fmr1、Foxg1、Hdac9、Robo2、Sema5a、Unc5c、Pafah1b1、Zfp91）构成的分子网络实现其促进神经发生的分子调控；（6）核心基因Hdac9和核心microRNA的变化可能提示传统针灸髓海理论艾灸“百会”补髓益智改善学习记忆能力、延缓脑老化还与表观遗传调控有关，为本课题的后续深入研究提供了新的靶点和方向。