ASPP2通过抑制肝细胞自噬降低HBV复制的机制研究

In our country，chronic hepatitis B is the main cause of liver cirrhosis, liver cancer and eventually causes patients death. Inhibition of hepatitis B virus (HBV) replication and reduce virus levels in peripheral blood is the main purpose of Hepatitis B treatment. Recent studies have shown that HBV can directly or indirectly induces cell autophagy , and complete their replication and packaging by using autophagy. So it is important to control autophagy to inhibit HBV replication. We found that p53 apoptotic stimuli protein 2 (ASPP2) not only significantly inhibited drug and starvation induced autophagy, but can also reduce HBV -induced autophagy and significantly reduce the levels of HBV replication . Therefore, we hypothesized "ASPP2 can reduce HBV replication by inhibiting HBV related autophagy ". This project intends to use the cell and mouse models , combined with modern cell and molecular biology techniques to analyze its related mechanisms. Liver tissues specimen from chronic hepatitis B patients are also used to perform clinical analysis to test this hypothesis. All these are to clarify the impact of inhibiting HBV-related autophagy of ASPP2 on HBV life cycle, and to provide new ideas for using ASPP2 to achieve control of HBV replication

慢性乙型肝炎是我国引起肝硬化和肝癌并最终导致患者死亡的最主要原因。抑制乙型肝炎病毒（HBV）复制，降低外周血病毒水平是乙型肝炎治疗的主要目的。最近研究显示HBV可以以直接或间接的方式引起细胞自噬，并能够依赖自噬完成自身的复制和包装，因此控制自噬对抑制HBV复制具有重要意义。我们研究发现p53凋亡刺激蛋白2（ASPP2）不仅能够显著抑制药物和饥饿引起的自噬而且能够降低HBV引起的自噬，并显著降低HBV的复制水平。因此，我们提出"ASPP2能够通过抑制HBV引起的细胞自噬而降低HBV复制"的假设。本课题拟利用细胞和小鼠模型，通过现代细胞和分子生物学技术对其进行相关机制分析，并利用慢性肝炎患者肝组织标本进行临床分析来验证这一假设，以期阐明ASPP2通过抑制HBV相关自噬对HBV生活周期的影响，为进一步通过ASPP2基因治疗来实现控制HBV复制提供新的思路。

慢性乙型肝炎是我国引起肝硬化和肝癌并最终导致患者死亡的最主要原因。抑制乙型肝炎病毒（HBV）复制，降低外周血病毒水平是乙型肝炎治疗的主要目的。研究显示HBV可以以直接或间接的方式引起细胞自噬，并能够依赖自噬完成自身的复制和包装，因此控制自噬对抑制HBV复制具有重要意义。我们研究发现p53凋亡刺激蛋白2（ASPP2）不仅能够显著抑制药物和饥饿引起的自噬而且能够降低HBV引起的自噬，并显著降低HBV的复制水平。因此，我们提出"ASPP2能够通过抑制HBV引起的细胞自噬而降低HBV复制"的假设。.本研究主要进展：.1）验证了我们提出的"ASPP2能够通过抑制HBV引起的细胞自噬而降低HBV复制"的假说：利用HepG2和HepG2.2.15细胞模型，我们研究发现，HBV感染可以引起肝细胞自噬的发生，而ASPP2能够抑制HBV引起的肝细胞自噬，降低细胞HBsAg和HBeAg的分泌及病毒水平。ASPP2抑制细胞自噬和促进细胞凋亡还可以非p53依赖的方式进行。.2）综合以上结果，我们发现ASPP2有望成为一种新的抑制HBV复制，降低HBV相关肝癌发生的重要分子，因此，在本课题的支持下，我们继续了ASPP2与肝癌细胞增殖的相关体内外探索性实验。.通过研究发现ASPP2的过表达能够抑制肝癌细胞HepG2和Huh7以及Hep3B的增殖，ASPP2敲减的细胞增殖能力、克隆形成能力和细胞迁移能力以及细胞周期进展均比对照细胞显著增强；体内实验发现，ASPP2-rAd能够对裸鼠皮下Huh7移植瘤产生良好的抑制效果。.通过本课题的研究，初步明确了ASPP2在HBV相关肝损伤以及肝细胞癌发生中的作用，为开发以ASPP2-p53为治疗手段的HBV相关肝癌治疗提供了重要线索。.