复杂多并指畸形的分子遗传学机制研究

多指和并指是人类最常见的先天性肢端畸形。申请者发现：SHH基因远程增强子ZRS拷贝数突变可导致三节指节拇指-多并指综合征（TPTPS）和V型并指（SD4）两种有表型重叠的复杂多并指畸形。本项目拟在前期发现基础上，深入探讨ZRS相关肢端畸形表型显著变异的分子遗传学基础。具体研究内容：1）应用荧光定量PCR检测TPTPS/SD4家系中患者基因组DNA重复，克隆断裂点并测序，推测DNA重复的发生机制；2）以小鼠胚胎发育早期肢芽为材料，采用染色体构象捕获(3C)技术，鉴定与ZRS协同决定SHH基因肢芽特异性表达的顺式调控元件并通过报告基因转基因小鼠实验加以验证；3）根据基因组DNA重复范围和累及SHH基因远程调控元件的情况，分析TPTPS/SD4中基因型-表型相关性；4）检测Hm小鼠并指模型中是否有新发现的顺式调控元件的突变。本项目是申请者前期创新性工作的延伸和扩展，有望进一步取得原创性成果。