炎症相关性microRNA对口腔扁平苔藓CD4+T细胞功能的调控效应研究

微小RNA (miRNA）对T细胞免疫应答具有重要的调控作用。在原有研究基础上，本课题提出口腔扁平苔藓（OLP）中CD4+T细胞功能异常受miRNA调控的新假设。（1）应用miRNA微阵列分析和qRT-PCR技术，筛选出OLP CD4+T细胞中差异表达的miRNA，分析其与炎症因子的关系，确定炎症相关性miRNA，应用生物信息学等方法预测和验证炎症相关性miRNA的靶基因。（2）通过质粒转染技术实现炎症相关性miRNA在OLP CD4+T细胞中的过表达和抑制，研究miRNA对炎症的干预效应。（3）应用流式细胞术等观察高表达炎症相关性miRNA对OLP CD4+T细胞的生物学作用。（4）构建OLP CD4+T细胞与角质形成细胞交互立体培养模型，研究炎症相关性miRNA对角质形成细胞的生物学效应。本课题对揭示OLP的免疫发病机制、探索诊治新思路，具有重要的理论意义和应用价值。

口腔扁平苔藓（oral lichen planus, OLP）是一种常见的由T细胞介导的免疫性疾病，其中CD4+T 细胞通过释放一系列细胞因子以及激活CD8+毒性T细胞参与OLP的免疫发病机制。研究显示异常表达的MicroRNAs (miRNAs)通过调控免疫细胞及免疫靶向细胞中的基因表达，在自身免疫病的发生、发展中发挥重要作用。本研究旨在探讨炎症相关性miRNA对OLP CD4+T细胞功能的调控效应。. 主要研究内容包括:（1）检测OLP外周血CD4+T细胞及组织中炎症相关性miRNAs的表达，分析其与疾病严重程度、炎性细胞因子和趋化因子的关系。（2）应用TargetScan和PicTar，预测并验证miRNA-155的靶基因SOCS1。（3）通过antagomir-155和agomir-155，研究miRNA-155对炎性细胞因子的影响。（4）检测miRNA-155对OLP CD4+T细胞增殖的影响。（5）研究miRNA-155对角质形成细胞生物学特性的影响。. 研究结果显示:（1）miR-155在糜烂型OLP患者PBMC及病损组织中表达水平显著增高，此外，OLP外周血中miR-155的表达水平与RAE计分呈正相关。 （2）外周血中高表达的miR-155与血清中的IFN-γ表达模式一致，而与IL-4表达模式相反。 （3）miR-155高表达的EOLP患者CD4+T细胞中，SOCS1 mRNA的含量下降，并且与miR-155的表达水平呈负相关。（4）EOLP CD4+T细胞中miR-155功能上调，可引起上清中IL-4和IFN-γ含量下降；其功能下调则会使IL-4含量增加而IFN-γ含量下降；IFN-γ可诱导EOLP患者CD4+T细胞中miR-155表达上升。（5）miR-155的调控功能会改变EOLP CD4+T细胞的增殖活性，而共培养体系中角质形成细胞的细胞形态和增殖活性都会因此发生改变。. 本研究提示OLP外周血中的miR-155可以作为潜在的生物学标志，评估OLP病情严重程度；EOLP CD4+T细胞中，miR-155可能通过靶位SOCS1与IFN-γ形成正反馈调控关系。本研究对揭示miRNA在OLP CD4+T细胞介导的免疫发病机制、探索诊治新思路，具有重要的理论意义和应用价值。