杏仁核潜在蛋白参与痛情绪发生及电针干预研究

Pain emotion is a negative emotion such as aversion, fear and anxiety caused by nociceptive and non-nociceptive stimulation, which coud influence the development and outcome. The morbidity of pain emotion in the chronic pain patients is around 70%. Amygdala is an importane nucleus on emotional modulation, and many receptor are invloved in the process, transmit and formation of pain emotion. Proteomics is an ideal method to screen the key protein of amygdala. In the study, proteomics is performed to screen the proteins about pain emotion. In order to select the key proteins of electro-acupuncture (EA), he protein maps of EA and pain emotion is compared. Furthermore, the key protein of amygdala involved in the pain emotion and EA are screened. The expression and function verification are then performed to clarified. This study will define our research direction on the mechanism of EA on pain emotion.

痛情绪是指伤害性和非伤害性刺激所引发的厌恶、恐惧、焦虑等负性情绪，慢性疼痛患者中痛情绪的发生率约70%。杏仁核被认为是中枢边缘系统中痛情绪调节的关键核团，已知核团内多种因子和受体参与痛情绪的加工、传递和形成；慢性疼痛中痛情绪的发生可能与杏仁核多种功能蛋白变化有关，采取蛋白质组学技术易于整体、客观地寻找其关键蛋白。已发现电针能有效干预痛情绪、调控杏仁核功能，有可能通过杏仁核中的关键蛋白调节痛情绪。本工作拟以弗氏完全佐剂致大鼠炎性痛模型，在观察不同时间大鼠慢性痛和慢性痛伴痛情绪发生的基础上，采用蛋白质组学技术，筛选杏仁核中持续参与痛情绪发生的差异蛋白；对比电针干预痛情绪大鼠的差异蛋白谱，筛选杏仁核中参与电针干预痛情绪发生的差异蛋白。进一步对差异蛋白进行表达和功能验证，明确杏仁核中参与痛情绪发生以及电针干预的潜在蛋白靶点。本研究将更深层次地说明慢性痛中痛情绪发生机制，阐明电针干预痛情绪的新机制。

【目的】以弗氏完全佐剂（CFA）致大鼠炎性痛模型，在观察不同时间大鼠慢性痛和慢性痛伴痛情绪发生的基础上，筛选杏仁核中持续参与痛情绪发生的差异蛋白以及参与电针干预痛情绪发生的差异蛋白，阐明杏仁核中参与痛情绪发生以及电针干预的潜在蛋白靶点。.【方法】1）痛厌恶情绪和痛相关焦虑变化时程特点：以CFA诱导的炎性痛大鼠为载体，von Frey丝法检测大鼠机械缩足阈，条件位置厌恶范式（CPA）观察不同时间点模型大鼠痛厌恶情绪的变化，旷场实验（OFT）和高架O迷宫（EZMT）观察焦虑样行为的变化特点；2）痛厌恶情绪的杏仁核蛋白质组学分析：以CFA诱导的炎性痛模型为载体，采用蛋白质组学技术鉴别具有痛厌恶情绪的炎性痛大鼠与无伴发痛情绪的炎性痛大鼠杏仁核中的差异表达蛋白，对差异蛋白进行表达验证，采用生物信息学方法对差异蛋白进行分析；3）电针干预痛厌恶情绪的杏仁核潜在蛋白筛选：以CFA模型为载体，在痛厌恶情绪发生时即进行电针干预，观察模型大鼠的痛觉异常和厌恶情绪情况；筛选杏仁核中参与电针干预痛厌恶情绪的差异蛋白，对差异蛋白进行表达验证。.【结果】1）CFA局部注射不仅诱发痛感觉异常，还能够引起痛厌恶情绪和焦虑样行为。CPA所体现的痛厌恶在炎性痛初期即有表现呈逐渐下降趋势；在OFT和EZMT中所体现的焦虑样情绪呈逐步上升趋势；这两种趋势在某一时间段可能重叠存在；2）慢性炎性痛伴有痛厌恶情绪时，痛阈显著下降；痛厌恶发生时，杏仁核中APC5、GAPDH、PMVK和PAK4等蛋白有特异性变化；3）电针能够有效缓解CFA诱发的痛觉过敏和厌恶情绪；初步发现杏仁核的蛋白GAPDH、GLT-1、PAK6和SPTA与痛情绪的维持以及电针干预有关。.【结论】CFA局部注射不仅诱发痛感觉异常，还能够引起痛厌恶情绪和焦虑样行为，且伴有痛情绪时痛阈显著下降；痛厌恶情绪发生时，杏仁核中APC5、GAPDH、PMVK和PAK4等蛋白有特异性变化，这些蛋白可能参与痛情绪的中枢调节过程；初步发现蛋白GAPDH、GLT-1、PAK6和SPTA等与痛厌恶情绪的维持以及电针干预有关。