辅加细胞的网片植入对盆底重建手术功能影响的实验研究

Implantation of unabsorbable polypropylene(PP) mesh in the vagina is the main surgical treatment to POP currently, howerver, the effect is not qiute satisfactory. It is a scientific problem needed to be solved in clinic that how to enhance the vaginal mucosa and reduce the exposure or rejection of vaginal implants to get better functional reconstruction. Based on the previous work, we intend to choose ewe, whose vagina is similar to human female, to construct the animal model of PP mesh with extra cells. By comparing the effects of PP mesh loaded human umbilical cord mesenchymal stem cells, smoth muscle cells, and both the two kinds of cells, with the PP mesh used in clinic at present, we’d like to study the histomorphology and biomechanics of vagina, which was implanted PP mesh with diffferent cells labeled by loading fluorescent protein gene transfection technique, in different time points, acquiring the conditions of muscle content change, angiogenesis and inflammatory cell infiltration after implantation, identifying the feasibility and the differences of PP mesh loaded with cells to the regeneration and function recovery of vagina, and to provide some basic data to the development of related original research about new surgical methods and products that might solve clinical problems.

阴道植入不可吸收的聚丙烯网片是目前治疗盆腔器官脱垂的主要有效手术方法，但功能恢复不尽人意。如何增加阴道黏膜厚度，减少阴道植入物暴露排异,更好的重建功能是临床亟待解决的科学问题。在前期工作基础上，拟选择与人阴道形态最相近的大动物绵羊为研究对象，建立聚丙烯网片辅加细胞的动物模型，通过聚丙烯网片上种植人脐带间充质干细胞;平滑肌细胞;人脐带间充质干细胞/平滑肌细胞与目前临床上应用的聚丙烯网片进行对照研究。对移植了负载荧光蛋白基因转染技术标记的细胞/聚丙烯网片的阴道在不同时段进行组织形态学和生物力学研究。了解植入期间，平滑肌含量变化，血管发生和炎性细胞浸润等情况。明确负载细胞的聚丙烯网片对阴道组织再生和功能恢复的可行性及其差别，为解决临床问题，研发原创新产品、新术式提供基础数据。

阴道植入不可吸收的聚丙烯网片是重度盆腔器官脱垂患者手术治疗的方法之一，然而，其恢复解剖效果满意但并发症如疼痛、感染等的发生率高。减少阴道植入物的暴露和排异是亟待解决的临床问题。本项目应用聚丙烯网片辅加人脐带间充质干细胞或聚丙烯网片辅加人脐带间充质干细胞分化的平滑肌样细胞来评价间充质干细胞在降低网片暴露和炎症等方面的作用以及对阴道组织再生修复的作用。提取人脐带间充质干细胞并以慢病毒转染绿色荧光蛋白GFP或红色荧光蛋白RFP来标记间充质干细胞；首先评价间充质干细胞或间充质干细胞来源的平滑肌样细胞通过基底膜基质matrigel附着在聚丙烯网片上后的生长和增殖情况；其次，建立大鼠卵巢切除模型，并手术植入聚丙烯网片或聚丙烯网片辅加不同细胞到阴道，评价不同时间段的组织形态和再生情况，炎症反应等。结果表明基底膜基质可以成功的使HUMSCs或HUMSCs分化来的平滑肌样细胞附着于聚丙烯网片上，并且不影响细胞的增殖。阴道植入物未发生暴露，12周取材时仍能检测到经荧光标记的人脐带间充质干细胞和人脐带间充质干细胞分化的平滑肌样细胞。12周时聚丙烯网片辅加两种细胞组的新生血管数量明显多于聚丙烯网片组。12周时辅加细胞组的再生组织的厚度要明显大于非辅加细胞组。12周时胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ在各组间无统计学差异。本项目研究表明人脐带间充质干细胞和（或）人脐带间充质干细胞分化的平滑肌样细胞有望作为将来盆腔器官脱垂患者盆底重建的种子细胞。辅加细胞的组织工程学网片增加新生血管的数量，增大再生组织的厚度，有望成为临床减少网片暴露、排异等并发症的新型材料。