晚期基因密码优化对HPV11病毒颗粒生成的影响

人乳头瘤病毒（HPV）感染对人类健康危害严重。因HPV的生活周期与宿主细胞分化状态密切关联，难以在普通的细胞培养条件下实现繁殖或扩增，导致HPV的基础与应用研究严重受阻。经典的上皮细胞三维培养虽可在体外诱导产生HPV颗粒，但量少、费时，远不能满足实际需要。悬浮培养等简易分化培养方法可诱导细胞发生部分分化，但不能产生病毒颗粒。这主要是由于编码HPV衣壳蛋白的晚期基因L1、L2中存在许多人类细胞少用的稀有密码子，导致病毒衣壳蛋白翻译效率低下所致。本研究基于上述结果，以HPV11为对象，拟通过二种方法提高细胞内HPV衣壳蛋白的表达：1）将密码优化的晚期蛋白真核表达质粒与HPV11DNA同时或顺序转染上皮细胞；2）将HPV11基因组DNA中的晚期基因编码区以密码优化基因替代后再转染细胞。对转染后细胞续行诱分化处理，观测病毒颗粒生成的可能性及效率，以探索简易、稳定获取HPV颗粒的新方法。