新生耐受对自身免疫性甲状腺炎免疫预防的研究

抗原特异性免疫耐受仍然是自身免疫性疾病领域的研究热点，而新生免疫耐受能有效的诱导长期对疾病的预防作用。本课题结合前期成功诱导新生小鼠对Graves病免疫耐受研究结果，拟给予不同剂量甲状腺球蛋白（mTg），经腹腔注射、皮下注射、口服3种途径干预出生0－24h的CBA/J小鼠，成年后再次注射mTg诱导EAT发生，通过检测甲状腺自身抗体，甲状腺组织病理改变，观察对该病的预防效果及持续时间。检测Th1/Th2/Th17细胞因子平衡转换，T细胞亚群比例，调节性T细胞数量和功能等变化，探讨免疫耐受诱导的可能机制。并通过观察过继转移或删除耐受小鼠调节性T细胞对耐受效果的影响，明确调节性T细胞在耐受诱导和维持中的作用以及机制。该研究成果将对探索桥本氏甲状腺炎乃至其他自身免疫性疾病的发病机制以及寻求更为合理有效的防治措施提供一条新的思路。

背景：.桥本甲状腺炎（Hashimoto's thyroiditis，HT）是最常见的自身免疫性疾病和内分泌系统疾病，是造成甲状腺功能减退的最常见的原因。虽然HT自身病情较轻，治疗较为简单，但HT患者即使进行有效的甲状腺激素替代治疗后，其生活质量仍存在不同程度的下降，罹患其他疾病的危险也明显增高，并且许多患者不能得到及时、有效的诊断、治疗。因此，探索新的防治措施十分重要。.内容：.本课题旨在探索新生期耐受、干预糖代谢、补充硒等3种措施对HT的预防效果，并初步探索其潜在的机制。.结果：..1）新生期通过口服pTg 100µg、10µg（分别为OR1、OR2组）和腹腔注射100µg、10µg（分别为IP1组、IP2组）两种途径接触抗原后，成年小鼠发生EAT的比例较HT对照小鼠下降（HT vs OR1 vs OR2 vs IP1 vs IP2，73.3 vs 46.7% vs 33.3% vs 53.3% vs 66.7%）。OR1、OR2组小鼠脾脏中Treg细胞数量较HT小鼠明显升高。IP1、IP2组小鼠脾脏中Th1细胞比例明显下降。.2）糖酵解特异性抑制剂3BP干预后，小鼠发生HT的比例较HT组小鼠下降（HT vs 3BP，73.3% vs 53.3%）。3BP小鼠脾脏中Treg细胞比例明显上升，Th1细胞、Th17细胞明显下降。糖酵解相关基因Glut1、MCT4的表达明显下降。.3）硒补充后小鼠（SeM组）发生HT的比例明显下降（HT vs SeM，73.3% vs 53.3%）。脾脏中Treg细胞比例明显上升，Th1细胞明显减少，Th17细胞明显下降。硒补充明显降低了本研究中涉及到的参与糖酵解的大多数关键基因，包括HIF-1α、Glut1、PKM、LDHα、MCT4。.意义.1）新生期免疫耐受是预防EAT发生的有效途径，口服抗原的效果优于腹腔注射。.2）抑制糖酵解能够预防EAT的发生。.3）硒补充能够有效预防EAT的发生，与3BP类似，其潜在的机制包括升高循环中Treg细胞数量、降低Th1细胞和Th17细胞的数量。.4）硒对T淋巴细胞能量代谢的调节是影响各淋巴细胞亚群数量、功能的重要机制。硒通过降低HIF-1α、Glut1、PKM2、LDHα、MCT4等糖酵解关键基因的表达而抑制细胞糖酵解，进而增加Treg细胞的数量，并减少Th1、Th17等效应性T细胞的数量。