CLD早产鼠中p16基因启动子甲基化对肺成纤维细胞增殖调控机制研究

应用已建立的早产鼠慢性肺疾病（CLD）模型及体外培养的肺成纤维细胞（LF），采用半巢式甲基化特异性PCR、流式细胞分析等分子生物学技术，研究高氧致早产鼠CLD中p16基因启动子异常甲基化对LF增殖的调控机制。研究内容为：1）以腺病毒介导p16基因感染及反义核酸阻滞p16表达，研究p16对LF细胞周期的调控机制；2）应用吸入不同浓度氧气的早产鼠肺组织及肺中的LF细胞，同步进行高氧导致p16基因异常甲基化作用的研究；3）应用去甲基化的5-氮胞苷处理体外培养的LF细胞，研究p16基因异常甲基化对LF异常增殖的影响作用。通过研究试图证实p16基因是调控LF细胞周期的主控基因之一；高氧可引发p16基因异常甲基化从而使p16基因及蛋白表达水平低下，导致LF细胞周期调控紊乱，结果CLD早产鼠LF细胞过度增殖发生纤维化。