超声微泡联合IKK／IκB／NFκB核定位信号通路介导SDF-1α基因转染促内源性干细胞靶向归巢心肌

内源性干细胞动员后靶向归巢心肌是未来治疗心梗的新趋势。直接注射干细胞动员剂存在安全性差、疗效不明确等缺点。寻求一种安全、高效的内源性干细胞动员归巢方式是当前面临主要问题。本研究拟构建一种联合超声微泡和IKK／IκB／NFκB核定位信号通路的基因载体系统，帮助SDF-1α基因先后跨越细胞膜和核膜两道屏障并表达足量SDF-1α，动员干细胞靶向归巢至受损心肌局部，分化为心肌细胞并促局部微血管新生。本研究分两部分：1 体外实验：构建"微泡- SDF-1α基因-NFκB结合基序"载体系统，体外转染细胞后检测SDF-1α基因入核效率及转染效率，并与普通微泡及逆转录病毒载体比较；2 体内实验：建立家兔心梗模型，"微泡-SDF-1α基因-NFκB结合基序"载体系统转染后，检测SDF-1α基因转染效率及促干细胞归巢效应。藉此建立一种高效的微泡基因载体系统并为心梗后干细胞靶向归巢治疗提供一种安全、高效的途径。

内源性干细胞动员剂SDF-1α(Stromal cell-derived factor-1α)可诱导干细胞靶向归巢心肌，已成为未来治疗心梗的新趋势。直接心肌内注射SDF-1α存在安全性差、疗效不明确等缺点，因此寻求一种安全、高效的内源性干细胞归巢方式是当前面临主要问题。介于此，本研究有针对性地设计了新型载体系统以帮助SDF-1α基因转染。（1）采用阳离子微泡作为基因载体，通过静电吸附法增加微泡对基因的携带率，同时保护基因免遭体内免疫系统清除，使基因能顺利到达靶细胞；（2）通过超声靶向微泡破坏技术（ultrasound targeted microbubble destruction, UTMD）使SDF-1α基因在心肌组织靶向释放，同时利用UTMD的生物效应帮助外源性基因穿过细胞膜进入胞浆；（3）利用NFκB核定位基序的核输入功能帮助胞浆中的SDF-1α基因进一步突破核膜屏障进入细胞核内进行基因复制和后续表达。本研究通过增加基因的入胞和入核效率，提高SDF-1α基因转染效率，使更多干细胞动员剂SDF-1α释放入血，从而增加干细胞归巢效应，增强心肌梗死疗效。