利用浸润性淋巴细胞研究富勒醇纳米颗粒对肿瘤生长的免疫抑制作用

对具有独特理化特性纳米颗粒的潜在生物学和临床医学应用研究是纳米科学关心的重要课题之一。金属富勒醇纳米颗粒的衍生物是近几年发现具有抗肿瘤特性并且无显著毒副作用的新型纳米化合物，尤其是金属富勒醇Gd@C82(OH)22具有用量小，肿瘤抑制率高和生物相容性好等优点，现已进入前期临床实验的研究阶段。但Gd@C82(OH)22是否通过调控淋巴细胞的免疫机制而抑制肿瘤的生长还不清楚。为此，本课题拟通过分离肿瘤特异侵润性淋巴细胞（Tumor-Infiltrating Lymphocyte；TIL）研究：1.Gd@C82(OH)22纳米颗粒对TIL的免疫诱导激活机制；2.激活的TIL在体内和体外对肿瘤细胞的抑制效应。从而揭示纳米颗粒与肿瘤内特异浸润性淋巴细胞的分子作用机理和抑制肿瘤生长的临床医学意义；同时为金属富勒醇纳米颗粒作为潜在新型高效纳米化疗药物在临床治疗中的应用提供实验和理论基础。

本研究在动物、细胞和分子等水平上研究了[Gd@C82(OH)22]n 对小鼠肝癌的治疗作用、毒性作用和免疫激活作用，并在逆转肿瘤抗药性方面做了尝试，主要取得了以下研究结果：. 1、[Gd@C82(OH)22]n对小鼠肝癌细胞不具备直接杀伤作用，不能够抑制小鼠肝癌腹水瘤，但可以有效抑制实体瘤，在细胞和动物水平上证实了[Gd@C82(OH)22]n与顺铂联合作用可有效提高实体瘤的抑制效率。. 2、[Gd@C82(OH)22]n对机体无毒副作用。低剂量顺铂可造成小鼠脾脏中含铁血黄素的沉积增多， . 3、[Gd@C82(OH)22]n能显著提高CD4+型T细胞的比例，在正常鼠和荷瘤鼠两组处理中，与对照组相比分别提高了21.9%和62.6%。[Gd@C82(OH)22]n可刺激IL-2和IFN-α细胞因子的分泌增多，通过增加CD4+型T细胞的Th1亚型细胞来实现对实体瘤的免疫抑制作用。IL-2可促进CD8+ 型T细胞的增殖从而增强对肿瘤的细胞免疫功能。. 4、[Gd@C82(OH)22]n与顺铂联合作用可有效杀伤具顺铂耐药性的肿瘤细胞，细胞内吞抵制实验证明：[Gd@C82(OH)22]n是通过增强抗药性细胞的内吞作用，使进入细胞内的顺铂增多，从而增强了顺铂对耐药性细胞的毒性，达到逆转肿瘤细胞耐药性的目的。