MR-1与MLC2相互作用对MLCK激酶活性和肿瘤细胞增殖运动调控的研究

肿瘤的发生率日益上升，对人类的危害也在不断升级中。肿瘤是一种由环境和遗传因素相互作用的多基因、多蛋白质参与的常见多发病。其发生涉及很多蛋白质的异常表达或者发生改变，癌症有关的蛋白质之间相互作用也因此受到越来越多的关注。MR-1为一个新发现的肿瘤相关蛋白，在多种肿瘤细胞中呈现高表达，并在细胞外与肌球蛋白轻链MLC2之间发生相互作用，其表达水平可影响MLC2/FAK/Akt信号转导通路的活化。本课题以此为基础，鉴定MR-1 同MLC2在细胞内的生理性相互作用，探讨细胞内MR-1对MLC2磷酸化和对细胞增殖运动的调控与MLCK的相关性，建立细胞外磷酸化方法，对MR-1调控MLCK磷酸化MLC2的激酶活性功能进行鉴定，本研究成果将为探讨肿瘤等疾病发生的调控机制提供有力的工具并对肿瘤的新药研制具重要的指导意义。

蛋白质与蛋白质之间的相互作用在细胞生命活动中扮演着重要的角色。肿瘤的发生涉及多基因变化，是多种基因和蛋白质相互作用的结果。与癌症有关的蛋白质之间相互作用也因此受到越来越多的关注。MR-1 为一个新发现的肿瘤相关基因，在多种肿瘤组织和细胞中呈现高表达。在体外与肌球蛋白轻链MLC2 发生相互作用。本研究以此为基础，进一步研究了MR-1 表达与MLC2 的活性对细胞增殖和迁移能力的影响,通过构建MR-1高表达稳定细胞株，考察该细胞株的增殖、克隆形成、伸展、粘附及运动迁移等能力是否发生变化，表明MR-1在增强MLC2磷酸化后，可显著增强细胞的粘附及运动迁移能力，并进行全基因组芯片分析考察哪些基因受MR-1的调控；用免疫共沉淀和生物共振能量转移法（BRET）对MR-1与MLC2之间的是否存在直接相互作用进行了研究，结果均为阴性，暗示它们之间可能没有直接的相互作用；此外研究还发现MR-1本身具备磷酸化，我们对它进行缺失突变，以研究其对MLC2磷酸化进行调控的具体机理，目前尚在进一步研究中。