移植动脉内皮细胞诱导活化态平滑肌细胞迁移至新生内膜促进移植动脉硬化的机制研究

Neointimal smooth muscle like cells (SMLCs) overproliferation is the basis of transplant arteriosclerosis (TA), and the transplant artery medial smooth muscle cell (SMCs) may be the main source of SMLCs, but the mechanism is not clear. Our previous study suggested that the chemokine RANTES secreted by endothelial cell (ECs) and PDE1 in activated SMCs probably play a key role in the process of SMCs directional migration to the neointima and TA promotion.. This project aims to establish mouse artery transplantation model, and they will be periodically injected with RANTES, Met-RANTES or IC86340 to observe the effect on TA by enhancing or reducing RANTES concentration or decreasing the expression level of PDE1; we will culture primary SMLCs, SMCs and ECs, real-time observing SMLCs and activated SMCs directional migration induced by pretreated ECs using microfluidic devices; simultaneously we will detect RANTES concentration and the expression level of PDE1, which is to investigate the mechanism of TA promoted by activated SMCs whose directional migration to neointima induced by the injured endothelial cells, and to explore effective preventive strategy of TA.

新生内膜平滑肌样细胞(SMLCs)的过度增殖是移植物动脉硬化(TA)的细胞学基础，移植动脉中膜平滑肌细胞(SMCs)可能为其主要来源，但募集机制不明。我们前期研究提示，内皮细胞(ECs)分泌的RANTES和活化态SMCs胞内表达的PDE1可能在SMCs定向迁移至新生内膜促进TA的过程中发挥重要作用。.本项目拟建立小鼠动脉移植模型，定期注射RANTES、Met-RANTES或IC86340，通过增强或降低RANTES作用或下调PDE1表达水平，观察其对TA的影响；体外原代培养SMLCs、SMCs及ECs，应用微流体装置，实时动态观察预处理后的ECs诱导SMLCs及活化态SMCs的定向迁移，检测RANTES浓度及PDE1表达水平，探讨内皮细胞诱导活化态SMCs迁移至新生内膜促进TA的作用机制，探索TA的有效防治策略。

1、移植动脉在炎症细胞浸润进入管壁之后，炎症细胞释放的各种炎症及细胞因子刺激动脉中膜平滑肌细胞并使其活化，同时炎症因子刺激管壁内皮细胞释放的细胞因子RANTES能够和活化态的中膜平滑肌细胞上的受体CCR1结合，诱导活化态中膜平滑肌细胞向移植动脉内膜迁移，从而促进了移植动脉内膜增生增厚，加速了移植动脉的管腔狭窄和移植动脉的硬化过程。.2、我们发现HN1在人乳腺癌细胞内的表达明显上调，并且HN1表达水平过高的乳腺癌患者总体生存时间明显缩短。实验中我们通过在乳腺癌细胞内过表达HN1，可以加速乳腺癌干细胞的转移和增殖，同时，HN1敲除的乳腺癌干细胞则上述现象明显降低。同时我们还发现c-MYC水平和HN1水平在乳腺癌细胞内成正相关。HN1可以促进c-MYC的分泌，同时促进其靶基因CDK4, CCND1, p21, CAV1和 SFRP1的高表达。在乳腺癌细胞中下调c-MYC表达水平可以显著降低HN1的过表达。.3、流行病学调查和荟萃分析发现洋地黄使用和乳腺癌发病风险之间存在一定关联，我们做了相关研究分析发现，过度使用洋地黄类药物可以使乳腺癌的发病风险明显增加，但现有流行病学证据仍然不确定，仍需要更好的设计研究，进一步揭示其分子机制。.4、研究发现肝癌的发病率在男性和女性中一直以来都是有明显差异的，我们认为雌激素对肝细胞癌的发生具有明显的保护作用。我们通过统计分析1992-2013年美国肝癌的发病情况，发现肝癌的总体发病率，男女比为3.55:1，25岁以下男女肝癌的发病率比小于2，随着年龄的增长，男女发病率明显升高，到50-54岁时，男女肝癌发病率比最高为5.40:1，特别是在亚太地区，女性病人的肝癌发病明显晚于男性病人平均11-15年。