TNF-α诱导Cx43异常分布在心梗后室性心律失常发生中的作用

心梗后快速性室性心律失常(Post-MI VT)的电生理机制是折返，而心肌缝隙连接蛋白Cx43异常分布是其折返形成的重要分子基质，目前尚不清楚决定Cx43异常分布的关键因子。已认识，心肌梗死过程是炎症反应过程，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是其中主要的炎症介质。研究表明，TNF-α有致心律失常作用，对心肌Cx43表达/分布有调控作用。预实验结果显示，心梗后心肌存在大量的TNF-α表达。大量表达的TNF-α是否对心梗后心肌Cx43异常分布的形成起关键作用？国内外尚无研究。本项目拟通过以下研究：心梗后心肌TNF-α的表达特征及其与Post-MI VT发生的关系，其对心肌Cx43异常分布的影响及调控机制，来阐明TNF-α诱导Post-MI VT分子基质形成的作用及机制，为建立以TNF-α为靶因子，干预TNF-α的作用，预防Post-MI VT防止心脏性猝死的治疗体系提供科学理论依据和支持。

心梗后快速性室性心律失常（Post-MI VT）的重要分子基质是心肌缝隙连接蛋白Cx43的异常分布，目前尚不清楚决定Cx43异常分布的关键因子。已知，心肌梗死是炎症反应，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是主要炎症介质。研究表明，TNF-α有致心律失常作用，对Cx43表达/分布有调控作用。心梗后心肌存在大量TNF-α表达，大量TNF-α对心梗后心肌Cx43异常分布的形成起关键作用？国内外尚无研究。本项目拟研究：①心梗后BZ区心肌TNF-α的表达特征及其与Post-MI VT发生的关系；②心梗后BZ区心肌Cx43的异常分布；③心梗后BZ区心肌Cx43的异常分布与该区TNF-α作用之间的关系以及TNF-α调控Cx43的信号机制；④检测缺血缺氧条件下心肌细胞TNFR表达情况；⑤检测缺血缺氧条件下离子通道（IK1、Ica-L）蛋白及电流的变化情况。结果：①心梗后BZ区心肌TNF-α表达的时间窗规律与Post-MI VT发生的规律基本一致；TNF-α螯合剂rhTNFR:Fc预处理，可使心肌TNF-α表达明显减少(P<0.05)，室性心律失常发生显著降低(P<0.05)；②心梗后BZ区心肌细胞Cx43磷酸化、非磷酸化比例改变，表现为磷酸化Cx43减少，非磷酸化Cx43增多，Cx43分布也发生变化，端-端分布减少，侧-侧分布增多；③心梗后BZ区心肌TNF-α表达时间窗规律与BZ区心肌Cx43分布异常特征一致；TNF-α螯合剂rhTNFR:Fc、p38MAP激酶抑制剂（SB203580）预处理，可使心肌TNF-α表达明显减少(P<0.05)，BZ区心肌Cx43磷酸化、非磷酸化比例失衡情况得到改善，表现为磷酸化Cx43增多，非磷酸化Cx43减少(P<0.05)，Cx43端-端分布增多，侧-侧分布减少；不仅如此，Post-MI VT发生亦显著降低(P<0.05)；④在轻中重度缺氧条件下，随着缺氧程度的增加，心肌细胞TNFR1的表达下调越明显(P<0.05)；⑤随着缺氧程度增加，心肌细胞离子通道（IK1、Ica-L）的蛋白和电流表达呈下降趋势。结论：心梗后大量表达的TNF-α与其受体结合，通过p38MAP激酶信号途径，调控心肌Cx43分布，在Post-MI VT的发生中发挥重要作用。