Jagged1/Dll4介导的Notch信号通路在子痫前期发病机制中的作用研究

滋养细胞侵润能力下降导致血管重铸障碍造成胎盘缺血缺氧的分子机制是子痫前期研究的关键和难点。Notch家族蛋白在早期胚胎发育和肿瘤血管形成中起重要作用。最新研究发现Notch配体蛋白Dll4和Jagged1存在平衡机制调控血管生成；我们发现Notch1、Jagged1在正常妊娠和子痫前期胎盘组织中存在特征性表达。据此推测子痫前期胎盘可能由于上述蛋白表达异常影响滋养细胞的生物学行为和胎盘血管床发育。现拟在上述基础上以胎盘滋养细胞为研究对象，围绕Jagged1/Dll4介导的Notch信号通路对滋养细胞生物学行为的调控这一关键命题，采用先进的分子和细胞生物学研究手段，重点解决其在子痫前期胎盘中是否存在异常表达及原因、具体如何影响胎盘滋养细胞侵润以及血管形成等关键科学问题，揭示Notch信号通路在子痫前期发病机制中的作用。

子痫前期（PE）是危害母婴健康的妊娠期特有疾病，发病机制尚未明确。目前公认PE是一种胎盘源性的疾病，滋养细胞侵润能力下降是PE发病的关键环节。.Notch是一个进化上保守的跨膜受体蛋白家族，在哺乳动物共发现4种Notch受体（Notch1-4），5种Notch配体（Jagged1、2和Dll1、3、4）蛋白。已发现Notch信号传导途径是胎盘发育过程中必需的信号通路，目前，对于Notch信号通路在PE胎盘内的研究文献不仅较少，而且尚没有PE胎盘内全部哺乳动物Notch受体和配体表达情况相关的研究；再者，Notch信号通路在胎盘或在滋养细胞内的作用机制知之甚少，故本课题先运用IHC、PCR、WB方法对早发重度PE胎盘所有哺乳动物Notch受体和配体进行定位、基因转录及翻译水平的详尽研究，筛选出早发重度PE胎盘内表达异常的Notch蛋白，继而进一步对这些差异表达的Notch蛋白进行体外细胞实验。结果显示：所有哺乳动物Notch受体和配体在胎盘滋养细胞中均有表达。另外，Notch1和Jagged1在胎盘血管内皮细胞上亦有表达。实时多聚酶链反应显示早发重度PE胎盘的Notch2 and Delta-like4的mRNA水平明显低于正常妊娠。而WB则提示早发重度PE胎盘的Notch3蛋白表达水平明显增高，Notch2的蛋白表达水平明显降低。体外细胞实验发现，对Notch进行干扰后促进BeWo、JAR细胞的增殖，S期细胞数增多的趋势，而对Notch进行过表达后细胞增殖速度变慢，S期细胞数减少的趋势；BeWo、JAR细胞Notch过表达后凋亡减少趋势，而Notch干扰后凋亡增加趋势；Notch上调后表现出增强滋养细胞株的迁移侵袭能力的趋势，而Notch降调后则表现出抑制滋养细胞株的迁移侵袭能力的趋势。.总之，我们在国内外首次研究了PE胎盘内全部哺乳动物Notch受体和配体的表达谱，并首次发现了在PE胎盘内高表达的Notch蛋白即Notch3，另外，本课题也首次探讨了Notch2 、Notch3对绒癌滋养细胞株生物学功能的影响，结果表明Notch信号通路、尤其是Notch2 、Notch3蛋白可能在早发重度PE发病中发挥一定作用，并提示可能通过影响滋养细胞增殖、凋亡、侵袭等多方面功能而引起PE的发生。