后处理抗心肌缺血再灌注损伤的细胞分子与线粒体机制研究

本项目拟在既往研究的基础上，（1）通过建立Langendorff离体灌注模型，观察缺血后处理、sarcKATP以及mitoKATP开放剂诱导的药物后处理，对大鼠心脏功能、组织能量代谢、以及心肌组织再灌注损伤拯救激酶表达的影响，分析保护效果与途径；（2）分离成年鼠心肌细胞，观察三种后处理方式对细胞内钙离子、钙敏感性受体以及钙网蛋白表达的影响，以及心肌KATP通道蛋白亚单位的表达与心肌细胞凋亡，并实时观测线粒体膜电位，探讨降低再灌注损伤的机制；（3）分离提取心肌线粒体，观察后处理线粒体生理功能以及超微结构的变化、线粒体膜心磷脂与细胞色素C含量、线粒体钙累积与活性氧产生，以及线粒体通透性转换孔，以明确线粒体的保护作用及机制；（4）提取线粒体蛋白行比较蛋白组学分析与鉴定，探讨后处理方式对线粒体蛋白的影响。为细胞分子水平和亚细胞水平揭示后处理心肌保护作用的机制，寻找药物后处理的作用靶点提供理论依据。