下调E2F1的表达对HDACI诱导AML细胞分化的影响及其机制

AML是一种严重危害人类健康的造血系统恶性肿瘤，寻找诱导AML分化的治疗策略正成为国际关注的热点。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACI）是诱导AML分化治疗的新途径，但其作用机制尚不清楚。我们前期工作发现,转录因子E2F1可能通过对C/EBPα的调控来抑制HDACI诱导的AML细胞分化。据此提出, E2F1的下调有望为增强HDACI的诱导分化效果提供新思路。本项目拟采用基因敲降和过量表达技术研究E2F1对HDACI诱导的AML细胞分化的影响；采用分子生物学技术研究E2F1对C/EBPα的表达、靶基因DNA结合、转录活性、C/EBPα乙酰化的影响；采用免疫沉淀技术研究E2F1和C/EBPα、C/EBPα和组蛋白乙酰化之间的相互作用；采用AML裸鼠异种移植瘤模型验证HDACI诱导AML的体内分化和抗移植瘤效应。旨在阐明HDACI诱导AML细胞分化的机制,为AML的防治提供新靶点和新途径。

急性髓性白血病(AML)是严重危害人类健康的造血系统恶性肿瘤，寻找新的诱导AML分化的治疗策略成为目前国际关注的焦点。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor, HDACI)可通过抑制组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性来相对提高组蛋白乙酰化酶（HAT）的活性，进而引起组蛋白乙酰化水平升高，使调控细胞分化的相关基因表达增加，进而促进细胞分化，达到治疗恶性肿瘤的目的。然而HDACI诱导AML细胞分化的分子机制仍不十分清楚。因此，随着对HDACI抗白血病作用机制的深入研究，HDACI作为诱导分化剂用于临床治疗AML将具有广阔的应用前景。. 本项目在建立E2F1寡聚核苷酸，siRNA或过量表达细胞模型的基础上，研究了E2F1敲降或过量表达对HDACI诱导的AML细胞周期阻滞和细胞分化的影响，探讨了HDACI诱导AML细胞分化的分子机制。通过研究，我们发现E2F1敲降可促进HDACI诱导AML细胞周期阻滞在G0/G1期，增加细胞分化，抑制细胞凋亡；E2F1敲降促进了HDACI诱导C/EBPα、NF-B和p21的表达增加；E2F1敲降促进了E2F1与靶基因的结合，抑制组蛋白H4的表达； E2F1敲降可促进E2F1和C/EBPα、C/EBPα和组蛋白H4 之间的直接结合增加；裸鼠异种移植瘤体内实验证实E2F1敲降可促进HDACI诱导AML的体内分化和抗移植瘤效应。E2F1过表达后则与上述结果相反。综合上述结果，E2F1是调控HDACI诱导AML细胞分化的重要分子靶标，它通过对C/EBPα、NF-B和p21等的调控在HDACI诱导AML细胞分化中发挥重要作用。本项目不仅为HDACI诱导AML细胞分化的分子机制提出新的理论认识，而起为增强HDACI对AML的治疗提供新的干预靶点和治疗途径。