siHYBRID技术沉默铜绿假单胞菌外排泵mexB基因体内外效应研究

siRNA在细菌中的RNA干扰作用近年得以证实，然而也难以克服被核酸酶水解和细胞导入率低两大问题。siHYBRID分子以一条正义DNA链代替siRAN中的RNA链，形成sense DNA/antisense RNA杂合分子。经过充分修饰的siHYBRID对核酸酶更稳定，在大肠杆菌中的基因沉默效果和持续效力明显优于单纯siRNA和siDNA分子。siHYBRID纳米脂质体细胞导入率高，尤其对巨噬细胞具有被动靶向导入作用。因此，本课题组在已掌握的EGS（体外引导序列）技术及mexB RT-PCR方法基础上，针对铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM，设计制备一种siHYBRID纳米脂质体分子，沉默其mexB基因，阻遏三种蛋白形成转运复合体而失去泵出功能，从而阻止或逆转细菌耐药。本研究将为探索多靶基因沉默，关闭细菌致病基因和生命基因，使siHYBRID分子最终成为选择性的高效杀菌药物奠定基础。