IL-17经miR-23b促进舌鳞状细胞癌发生和发展的机制研究

Recent studies have revealed that interleukin 17(IL-17) is upregulated in numerous malignant tumors and suggested that IL-17 is a novel risk factor of tumor development. However, the role of IL-17 in tongue squamous cell carcinoma (TSCC) is largely uncovered. Our preliminary results show that IL-17 is elevated in both serum and local tumor tissue of TSCC patients. In contrast, the expression level of miR-23b is opposite regulated. This proposal will emphasize on the study of IL-17/miR-23b signaling pathway during the progression of TSCC. We will first explore the potential roles of IL-17 in TSCC patients, through analyzing serum and local IL-17/miR-23b levels and their relationships with clinicopathological factors of TSCC. Next, to examine the biological roles and molecular mechanisms of IL-17/miR-23b at cellular level, we will treat the cultured TSCC cell lines with pharmacological agonist/inhibitors or gene overexpression, followed by testing the roles of miR-23b as well as its signal pathway molecules-NF-κB, ZEB1, and MMP2 in IL-17-mediated TSCC proliferation and migration. Our study will provide in-depth knowledge to the current understanding of IL-17 and miR-23b in TSCC development, and give insight to novel diagnostic and therapeutic target for TSCC.

近年来发现促炎因子IL-17在多种恶性肿瘤中表达增加，提示IL-17可能是参与肿瘤发生发展的新危险因子，但IL-17在舌鳞状细胞癌(舌癌)中的作用尚不了解。我们的预实验显示舌癌患者血清及肿瘤组织IL-17表达升高，而miR-23b表达降低。本课题拟以IL-17/miR-23b通路为重点，对舌癌患者及健康志愿者进行病例对照研究，分析血清、肿瘤局部IL-17/miR-23b含量与舌癌临床病理指标的关系，从整体和组织水平揭示IL-17在舌癌发生发展中的作用。在体外培养的舌癌细胞系观察IL-17对肿瘤细胞生物学行为的影响；采用药理学及基因转染技术在细胞和分子水平上探讨miR-23b及其上下游分子NF-κB、ZEB1和MMP2在IL-17介导的舌癌细胞增殖和迁移中的作用。该项目将有助于加深对IL-17和miR-23b在舌癌发病机制中作用的认识，也为舌癌的诊断和治疗提供新的思路和药物靶点。

肿瘤微环境的多种成分可通过一系列的促炎因子的异常表达形成肿瘤周围的慢性炎症状态，进而促进肿瘤的发展。其中，白介素-17A（Interleukin-17A，IL-17A），又称IL-17，是一类主要由T辅助细胞17分泌的促炎细胞因子，其可作为促癌分子或抑癌分子参与多种恶性肿瘤的发生发展。舌鳞状细胞癌是发病率最高的口腔鳞状细胞癌，其恶性程度高，生长快，浸润性较强。随着肿瘤免疫学的发展，针对肿瘤微环境的研究越来越多，舌癌的肿瘤微环境尚需进一步探讨，其中微环境中的IL-17A对舌癌细胞的调控作用及相关机制尚未见报道。本研究以舌癌患者的血清及组织标本和舌癌细胞系SCC15为实验对象，探讨IL-17A在舌癌发生发展中的作用。结果显示舌癌患者血清IL-17A水平显著高于对照组，IL-17A及IL-17RA mRNA在舌癌组织中的表达均较癌旁组织显著上调，且发生颈淋巴结转移及晚期舌癌患者的血清IL-17A高于未发生颈淋巴转移及早期舌癌患者；细胞实验表明IL-17A不影响细胞增殖，但可促进舌癌细胞迁移和侵袭能力；miR-23b在舌癌组织中的表达较癌旁组织显著下调，并且与相对应的IL-17A的表达水平呈现负相关，提示在舌癌中IL-17A可能通过下调miR-23b发挥促癌作用；IL-17A作用SCC15细胞3 h和6 h之后可显著下调细胞内miR-23b的表达量；而预孵育NF-κB的抑制剂PDTC可阻断IL-17A下调miR-23b的作用。IL-17A能够上调p-IKKα和p-IκBα的表达，促进p65发生核转位，激活NF-κB信号通路。同时NF-κB通过结合在miR-23b转录起始点前-394至-385 bp区域发挥下调miR-23b转录的功能，该结果表明在舌癌细胞内IL-17A通过激活NF-κB信号通路下调miR-23b的表达。miR-23b可显著抑制细胞的迁移和侵袭能力且抑制versican的表达；Versican在TSCC组织中的表达较癌旁正常组织显著上调。IL-17A可显著上调versican的mRNA和蛋白表达量。研究表明IL-17A通过激活NF-κB信号通路促进p65核转位，通过下调miR-23b而上调versican的表达，促进舌癌细胞迁移和侵袭。本研究结果为阐明促炎因子IL-17A在舌癌发生发展中的作用提供了实验依据，并为舌癌的早期诊断、治疗和预防提供了参考。