miRNA靶位点遗传多态性调控骨质疏松机理研究

骨质疏松是一种严重影响人类健康的全身系统性骨骼疾病。申请者前期开展了两项全基因组关联扫描研究，发现FGF2基因（成纤维细胞生长因子 2) 的3′端非翻译区域的遗传多态性位点rs6854081为miRNA潜在靶位点，且与骨质疏松相关联，本项目拟采用miR-146a介导下等位基因特异荧光素酶表达、miR-146a介导下的FGF2基因mRNA的半衰期试验、等位基因特异的FGF2蛋白质和mRNA等实验，可靠和有效地研究miRNA、靶位点多态性、基因表达产物三者之间的复杂调控机理，从而清晰阐明miRNA介导下的靶位点多态性与骨质疏松相关联的复杂机理。研究miRNA及其靶位点多态性,可为遗传多态性的功能提出新解释,可为包括骨质疏松在内的人类多基因复杂疾病遗传易感性的研究提供新思路。本研究也可进一步阐明和理解骨质疏松症的致病机理，为揭示骨质疏松症的遗传机理提供更深的认识。

骨质疏松症是一种以低骨密度和低创伤性骨折为主要特征的严重影响人类健康的全身系统性骨骼疾病。骨质疏松症受很强的遗传决定，但是大多数遗传/表观遗传因子未被鉴定。骨密度是骨质疏松症的主要研究表型。本项目以阐明miRNA在骨质疏松的发病机理为主要研究目标。申请者前期开展的全基因组关联扫描研究，发现FGF2 基因（成纤维细胞生长因子 2) 的3′端非翻译区域的遗传多态性位点rs6854081为miRNA 潜在靶位点，且与骨密度相关联。我们的后续研究发现该miRNA靶位点多态性与BMD关联的重复性证据，该rs6854081在另一个独立的1,728随机个体中与骨密度也存在关联，TT基因型个体的股骨颈平均骨密度高于GG基因型个体，Fisher’s 整合P值显著高于单独研究的P值。在骨相关细胞（单核细胞、B细胞）基因表达分析表明，FGF2基因的mRNA表达水平在三个独立的群体（高骨密度组VS.低骨密度组）中都存在差异，而且方向一致。本项目还征集了极端高骨密度组和极端低骨密度组，每组5人，每个人抽血分离单核细胞，对每个个体同时用Affymetrix® GeneChip® miRNA 2.0 Array和Affymetrix Human Exon 1.0ST Array分型，鉴定的差异表达的miRNA和mRNA，所鉴定的差异表达miRNA可能与BMD相关，其调控的靶基因如BMP2、RUNX2、ESR1、SMAD2等是骨代谢密切相关的基因。miRNA和mRNA负相关分析表明hsa-mir-34a与多个靶基因存在显著的负关联。本项目对骨质疏松相关的miRNA 及其靶位点多态性进行的深入研究，可为遗传多态性的功能提出新解释，为骨质疏松症的表观遗传机理研究提供新思路。本研究也可进一步阐明和理解骨质疏松症的致病机理，为揭示骨质疏松症的遗传机理提供更深的认识。