以调节性B细胞为基础探索H.pylori感染减轻DSS诱导肠炎的机制

Epidemiologic studies show that there was an inverse association between Helicobacter pylori (H.pylori) and inflammatory bowel diseases (IBD). Our previous researches have shown that regulatory B cells (Bregs) in spleen,mensentric lymph nodes (MLN),gastro-intestinal mucosa expanded significantly after H.pylori infection. In the murine model of acute colitis induced by dextran sulphate sodium following H.pylori infection,H.pylori/DSS co-treated mice manifested mild colitis,and the frequencies of Bregs in spleen,MLN and PPs were higher compared with DSS treated mice. In this study, a murine model of H.pylori infection will be established to detect the changes of intestinal immunity and the immune microenvironment, as well as the expression of gut-homing chemokine receptor in gastric mucosa and secondary lymphoid tissues，with the aim of studying intestinal immunity after H.pylori infection and the expansion or sources of intestinal Bregs. We will also explore the mechanism of DSS-induced colitis alleviation caused by Bregs with a CD19-/- murine model of DSS-induced colitis and adoptive transfer of Bregs. Our study will lay the foundation of exploring the immune crosstalk between stomach and gut，provide new approach to prevention and treatment of IBD.

流行病学研究显示，H.pylori感染与炎症性肠病（IBD）的发病率呈负相关性。课题申请组前期研究显示，H.pylori感染可以诱导脾脏、肠系膜淋巴结（MLN）、胃肠黏膜中调节性B细胞（Breg）出现显著扩增。在胃部感染H.pylori后给予DSS诱导急性肠炎动物模型中，H.pylori/DSS共处理组较单纯DSS处理组小鼠肠炎表现显著减轻，且脾脏、MLN、派氏淋巴结（PPs）中Breg细胞扩增更明显。在本研究中拟通过构建H.pylori感染动物模型，检测肠道免疫状态及免疫微环境的变化，以及胃黏膜及外周淋巴组织中肠道归巢趋化因子受体的表达，研究H.pylori感染后肠黏膜免疫改变及肠道Breg细胞的增殖与来源，并通过 CD19-/-小鼠诱导DSS肠炎与Breg细胞回输实验，探索Breg细胞减轻DSS诱导肠炎的机制，为胃肠免疫对话研究奠定基础，为IBD的防治探索新的途径。

流行病学研究显示，H.pylori感染与炎症性肠病（IBD）的发病率呈负相关性。前期研究结果显示，H.pylori感染减轻DSS诱导急慢性肠炎，并伴有Breg细胞扩增。本研究旨在探究Breg细胞在H.pylori感染减轻DSS肠炎中的作用机制。H.pylori感染促进小鼠肠系膜淋巴结中Th1、Th17型细胞免疫应答，抑制Th2型细胞免疫应答，促进脾脏及肠系膜淋巴结中调节性T细胞、调节性B细胞及调节性DC细胞扩增。此外，H.pylori感染能够通过调节肠黏膜局部细胞因子的分泌影响肠黏膜免疫微环境。H.pylori感染小鼠脾脏CD19+CD5+CD1d+Breg细胞中细胞因子、趋化因子、细胞分化等通路相关mRNA表达水平改变，可能参与H.pylori感染诱导免疫耐受过程。在B细胞缺陷小鼠诱导肠炎模型中，CD19-/-小鼠DSS诱导急性肠炎较野生型小鼠更严重，说明B细胞对DSS诱导急性肠炎具有保护作用，DSS诱导肠炎同样可以促进CD19-/-小鼠GALT中Treg细胞显著扩增，抑制肠黏膜中Th1、Th17细胞免疫反应。Breg细胞回输可以显著改善DSS诱导急性肠炎的表现，Breg细胞回输肠炎组可能通过Breg细胞直接抑制肠道炎症，也可能通过诱导Treg细胞扩增，抑制Th17细胞分化，进而减轻肠道炎症。Breg细胞回输至CD19-/-小鼠可显著影响受体小鼠免疫平衡状态，表现为MLN中Treg细胞含量升高，结肠黏膜免疫平衡倾向于免疫耐受，这可能是通过回输Breg细胞分泌IL-10直接影响免疫状态，或是通过分泌TGF-β进一步促进Treg细胞扩增，协同改变肠黏膜免疫平衡状态。本研究对H.pylori感染后肠道免疫及Breg细胞的转录组进行测序分析，研究Breg细胞在H.pylori感染减轻DSS肠炎中的作用机制，为IBD的临床治疗提供新的思路，有助于深入研究胃肠道调节性免疫机制。