锌指蛋白A20对大鼠腹膜透析相关性腹膜炎内质网应激-NRLP3炎症小体信号的干预

Peritoneal dialysis(PD)-related peritonitis constitutes amajor complication of PD, representing the main cause of technique failure. Downstream signaling pathways of Endoplasmic reticulum stress(ERS) are reported to be involved in the process of nucleotide-binding domain(NOD)-like receptor protein3(NLRP3) inflammasome activation. The NLRP3 inflammasome has a critical role in PD-related peritonitis. Inhibition of ERS concomitant the block of NLRP3 inflammasome activation. Zinc finger protein A20 is one of the regulator protein in vivo which play a key role in maintain immune homeostasis, A20 can suppresses NLRP3 inflammasome activity through restricts ubiquitination pathway. Recently, our study show that A20 overexpression in rat peritoneal mesothelial cells(RPMCs) attenuated the protein expression of glucose-regulated protein(GRP)78 which is well known as a marker of ERS, this strongly indicated that A20 may repress the occurrence of ERS induced by LPS. According to the event, we presumed that overexpression A20 in peritoneal mesothelial cells may down-regulate the effect of ERS induced by LPS, and then attenuated NLRP3 inflammasome activation. So, We propose to explore the potential mechanism which A20 blocked the effect of ERS-NLRP3 axis in PD-related peritonitis through in vivo and in vitro experiment.

腹膜透析(PD)相关性腹膜炎仍然是导致PD失败主要原因。内质网应激(ERS)下游信号活化NLRP3炎症小体，NLRP3活化效应在PD相关性腹膜炎中起关键作用。抑制ERS可阻遏NLRP3活化。锌指蛋白A20是体内极为重要的免疫调节蛋白，可通过泛素化途径抑制NLRP3的活性。我们发现，A20过表达可阻抑内毒素（LPS）诱导大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）表达ERS的标志性蛋白GRP78，因此强力提示A20可能负性调节LPS诱导的ERS。因此，我们推测腹膜间皮细胞高表达A20基因可通过阻抑LPS诱导的ERS效应，进而抑制NLRP3炎症小体的活化。为此，我们拟从体内外实验进一步探讨A20调节ERS-NLRP3轴生物学效应的可能机制。

腹膜透析（PD）是慢性肾功能衰竭的重要替代治疗方法之一。PD 在我国有非常广阔的应用前景。然而，PD 相关性腹膜炎仍然是导致 PD 失败主要原因，亦是患者死亡风险增加的重要原因。内质网应激（ERS）在 PD 相关性腹膜炎的发生发展过程中起重要作用。锌指蛋白A20是体内极为重要的免疫调节蛋白，我们发现，A20过表达可阻抑内毒素（LPS）诱导大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）表达ERS的标志性蛋白GRP78，因此强力提示A20可能负性调节LPS诱导的ERS。因此，我们推测腹膜间皮细胞高表达A20基因可通过阻抑ERS效应，进而保护腹膜间皮细胞功能。为此，我们初步从体外实验探讨了A20对ERS生物学效应的调控作用。结果显示，内质网应激可诱导大鼠腹膜间皮细胞A20的表达，过表达A20可抑制内质网应激相关功能蛋白的表达，A20促进了内质网应激时CHOP由胞浆向胞核移位。此外，过表达A20不仅可抑制内质网应激本身的效应蛋白的表达，还可抑制其诱导的上皮细胞转分化相关功能蛋白的表达。A20的细胞生物学功能及其广泛，涉及如炎症反应、细胞凋亡、泛素化、内质网应激等相关功能蛋白的调控过程。本项目首次通过体外实验探讨了A20与内质网应激的相互作用，尤其是发现“A20促进内质网应激时CHOP由胞浆向胞核移位”，这可能是A20干预内质网应激的关键步骤，对进一步探讨A20的生物学功能有重要的提示意义，也是我们下一步科学研究的重要支点，其深层次的机制有待进一步探讨。本项目初步为基因靶向治疗的基础研究向临床应用的快速转化提供了实验依据，也为进一步保护腹膜透析患者腹膜功能奠定了一定的基础。