膜联蛋白5对大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成的调控及机制研究

迟发性性腺功能低下（LOH）是男科界的研究热点。发现并阐明Leydig细胞睾酮（T）合成的新的调节机制，对生殖内分泌尤其是LOH的研究有重要的理论价值和实用意义。我们先前首次发现膜联蛋白 5（A5）能刺激Leydig细胞合成T。本课题拟在此基础上进一步研究（1）：通过测定17α-羟孕烯醇酮和孕酮含量，分析A5调控T合成的细胞内途径；（2）：通过细胞内一些关键酶（3β-HSD、类固醇异构酶等）的测定，分析参与A5调节T产生的关键酶；（3）：用A5和LH分别或共同作用于Leydig细胞，通过对细胞内T及StAR、P450scc等前体物质的分析，比较A5与LH对T合成调节作用的异同；（4）：通过细胞内信号分子的测定及A5和信号传导物的拮抗剂、激动剂等物质共同作用于Leydig细胞后，T的测定，分析A5调节T合成的信号传导机制。本课题属源头创新，预期结果的取得将对临床LOH等疾病的治疗提供新方法。

为了进一步研究annexin 5在生殖系统中的作用，我们建立了annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的差异蛋白谱，探讨annexin 5调控大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌和增殖的具体机制。重组的大鼠annexin 5促进原代大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌，其机制可能是促进StarD7与胆固醇结合，并介导胆固醇向线粒体内膜转运而实现的。annexin5对原代大鼠睾丸间质细胞的增殖有促进作用，并呈时间和剂量依赖性。并促进睾丸间质细胞周期由G2期向M期的转变，可能是通过调节细胞周期相关蛋白cyclinB1以及CDK1的表达来实现的，且Ect2可能参与调节annexin 5调控睾丸间质细胞有丝分裂胞质收缩环的形成过程。