促甲状腺激素对脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及其机制的实验研究

Adipose tissue is an important organ for insulin resistance,adipocyte can produce many kinds of cytokines and express TSH receptor.TSH elevation can cause insulin resistance,subclinical throid disease and TSH within the normal range are associated with metabolic syndrome and its components, but its mechanism is unknown.This study will use subclinical hypothyroid Wistar rats and 3T3L1 cell to discuss in TSH elevation state,①expression of IR、IRS-1、PI-3K、p85αsubunit、Akt、GSK3；②expression of GLUT4；③expression of leptin 、adiponectin、resistin、RBP4、TNFα、IL-6.Discuss the mechanism of insulin resistance in TSH elevation state,and try to prevent patients with subclinical hypothyroidism from sufferring from insulin resistance.

脂肪细胞是胰岛素抵抗发生的重要部位之一，脂肪细胞分泌多种脂肪细胞因子且表达促甲状腺激素受体。研究表明，TSH水平的增高可导致胰岛素抵抗的发生，亚临床甲状腺功能异常，甚至正常范围的TSH水平均与代谢综合征及其组成成分相关。然而其中的机制尚不明确。本研究拟在亚临床甲减大鼠动物模型及TSH刺激的3T3-L1细胞中探讨高TSH状态下①脂肪细胞胰岛素信号转导通路中IR、IRS-1、PI-3K、p85α亚基、Akt、GSK3等关键蛋白表达水平及其活性变化；②脂肪细胞GLUT4表达的变化；③脂肪细胞瘦素、脂联素、抵抗素、视黄醇结合蛋白-4、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的表达水平的变化。从分子水平探讨TSH增高导致脂肪细胞发生胰岛素抵抗的机制，从而为预防亚临床甲减患者发生胰岛素抵抗及进一步的干预提供理论依据。

背景：脂肪细胞是胰岛素抵抗发生的重要部位之一，脂肪细胞分泌多种脂肪细胞因子且表达促甲状腺激素受体。研究表明，亚临床甲状腺功能异常，甚至正常范围的促甲状腺激素水平的升高均可以介导胰岛素抵抗的发生。.目的：本研究本研究拟在亚临床甲减大鼠动物模型及TSH刺激的3T3-L1细胞中探讨高TSH状态下胰岛素信号转导通路的关键蛋白、GLUT4以及多种脂肪细胞因子表达水平的变化，探讨TSH增高导致脂肪细胞发生胰岛素抵抗的机制。.方法：通过甲状腺切除和皮下注射L-T4的方法，构建临床甲减和亚临床甲减的Wistar大鼠模型，留取各组附睾周围的内脏脂肪组织，分别采用Western blotting、Real－time PCR法检测上述指标蛋白及mRNA表达水平。同时，在不同TSH水平下培养分化3T3-L1细胞，检测相关指标的表达水平。.结果：动物模型中，临床甲减和亚临床甲减大鼠内脏脂肪组织胰岛素抵抗水平加重，且这种改变伴随着leptin、TNF-α、IL-6、RBP4水平升高，以及脂联素、Resistin表达水平下降。细胞实验证实，TSH刺激能够诱导3T3-L1脂肪细胞上述脂肪因子分泌水平的变化，其变化趋势与动物实验一致。阻断TSHR cAMP/PKA通路，改善细胞水平胰岛素抵抗。.结论：TSH，激活cAMP/PKA信号通路，介导多种脂肪因子和GLUT4表达的改变，从而参与胰岛素抵抗的发生、发展。