基于肝素酶CTL表位多抗原肽(MAP)疫苗的设计及其抗肿瘤免疫效应研究

中晚期肿瘤由于多发生转移目前仍缺乏有效的治疗手段。肝素酶是近年来发现的与肿瘤浸润和转移密切相关的基因。我们研究表明，肝素酶可以作为一种肿瘤转移相关抗原用于肿瘤的免疫治疗，并成功鉴定出3条人肝素酶CTL表位和2条小鼠肝素酶CTL表位;研究表明，上述多肽疫苗体内外均可诱导肝素酶特异性的CTL反应，对肝素酶阳性且MHC匹配的肿瘤细胞具有明显的杀伤效应，而对自体淋巴细胞不具有杀伤作用，提示肝素酶多肽疫苗具有安全、特异、有效的特点。多肽疫苗具有不需要病毒载体、体外可以合成等优点，但其分子量小，免疫原性较弱，易降解。为克服上述缺点，本项目拟在前期研究的基础上，设计人和小鼠肝素酶MHC限制性多抗原肽(MAP)疫苗，体内外研究其抗肿瘤活性，并与肝素酶CTL表位单体疫苗及全长cDNA疫苗进行对比，同时研究肝素酶MAP疫苗对自体淋巴细胞和DC的杀伤作用，为基于肝素酶CTL表位的MAP疫苗临床应用提供理论依据。

中晚期肿瘤由于发生转移而缺乏有效的治疗手段。肝素酶是近年来发现的与肿瘤浸润和转移密切相关的基因。我们过去的研究表明肝素酶可以作为一种广谱的肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤的免疫治疗。但肝素酶表位肽疫苗具有分子量小、结构简单、易降解、免疫原性弱的缺点，在本研究中我们构建了肝素酶表位MAP疫苗，并在体外及荷瘤小鼠体内研究肝素酶MAP疫苗的抗肿瘤免疫效应。结果发现肝素酶表位肽诱导的CTL对多种不同组织器官来源的肿瘤细胞具有明显的杀伤效果，且肝素酶MAP肽诱导的杀伤效果明显优于相应单肽诱导的杀伤效果。肝素酶特异性 CTL 对自体淋巴细胞和 DC 无杀伤效应。荷瘤小鼠体内研究结果显示小鼠肝素酶MAP肽可以增强荷瘤鼠的免疫保护及免疫治疗效应，并且可以明显增加荷瘤鼠的生存率，延长荷瘤鼠的生存时间。肝素酶MAP肽不仅能激发较相应单肽更强的特异性的抗肿瘤效应，而且还能诱导一个较相应单肽更强的非特异性抗肿瘤的良性循环，这种肝素酶MAP疫苗具有高效、特异、安全的特点，为肝素酶MAP肽疫苗的临床应用提供了理论和实验依据。