基于SIRT1与IGF-1信号通路串话探讨消膏转浊方调控肥胖症不同脂库脂质代谢失稳态的机制

It is a new viewpoint to do the research of lipid dyshomestasis based on cross talk between SIRT1 with IGF-1 signaling pathways at different fat depot exploring mechanism of obesity.We have got some evidences that Xiao Gao Zhuan Zhuo Fomula might treat obesity on triglyceride metabolism from our prior clinical and pilot study results.Our hypothesis is Xiao Gao Zhuan Zhuo formula can Up regulate SIRT1→improve cross talk→down regulate transcription→control enzymes activity→lipogenesis↓lipolysis↑,and might not be same at different depot. So we plan to measure activity, distribution,expression and function on different fat depot of cross talking factors,transcription factors and key enzymes with gene and protein technics in obesity rats and 3T3-L1 adipocytes.This study will clear and definite Xiao Gao Zhuan Zhuo Fomula's molecular mechanism,and will be a new viewpoint to explore and explain TCM treatment for obesity.

脂质代谢和脂肪分布的区域性是肥胖症研究的两大热点，但是基于SIRT1与IGF-1信号通路串话的研究二者是热点间的"真空"地带；《内经》肥胖"膏脂分布"与现代肥胖学"脂肪分布"有相似之处，以膏、浊、脂论肥胖并应用消膏转浊方进行干预，前期研究已证实具有较好的调脂减重的临床疗效，作用机制尚待研究。我们推测：消膏转浊方可能通过上调SIRT1→改善SIRT1与IGF-1通路的串话环节→抑制转录环节→调控下游关键酶的活性→减少TG合成，增加TG分解，从而改善脂质代谢失稳态；并且该方可能对不同脂库的调控作用存在差异。为证实这一假说，采用肥胖大鼠和3T3-L1脂肪细胞模型，应用基因蛋白技术平台，动态观察不同脂库脂质含量，脂肪细胞形态及功能，串话因子、转录因子及靶基因的活性、分布、表达和功能，明确消膏转浊方作用的分子机制，为中医药调脂减重提供新的思路。

脂质代谢和脂肪分布的区域性是肥胖症研究的两大热点，但是基于SIRT1与IGF-1信号通路串话的研究二者是热点间的“真空”地带；《内经》肥胖“膏脂分布”与现代肥胖学“脂肪分布”有相似之处，以膏、浊、脂论肥胖并应用消膏转浊方进行干预，通过肥胖模型大鼠在体实验和前3T3-L1脂肪细胞离体实验，应用基因蛋白技术平台，动态观察不同部位脂质含量，脂肪细胞形态及功能，串话因子、转录因子及靶基因的表达，结果提示：1.消膏转浊方对肥胖大鼠具有减重、降脂及减少内脏脂肪细胞体积、降低细胞内脂质含量的作用。此作用可能通过SIRT1—FOXO1和IGFBP1—AKT—FOXO1两条通路共同进行的。一方面，该方上调SIRT1通路启动因子SIRT1、两条通路的串话因子FOXO1，有可能是通过激动SIRT1去乙酰化促进脂肪组织FOXO1的表达；另一方面通过下调IGF-1通路的上游因子IGFBP1—AKT通路上的IGFBP1、PI3K、AKT，抑制了脂肪组织FOXO1的磷酸化使其表达增加。2.消膏转浊方部分改善肥胖大鼠脂质代谢可能通过上调SIRT，改善SIRT1与IGF-1通路的串话环节FOX01,同时抑制IGF-1通路上的转录环节而调控下游脂肪代谢关键因子的表达从而减少TG合成，增加TG分解，改善脂质代谢稳态；并且根据实验结果推测对内脏脂肪部位的SIRT和FOXO1调控作用大于皮下脂肪。3.消膏转浊方含药血清培养3T3-L1脂肪细胞，显著上调SIRR1和FOXO1基因和蛋白的表达，部分通过SIRT1激活SIRT1-FOXO1通路，部分通过抑制IGI-1通路上的上游因子IGFBP1、PI3K,AKT的活性，从而增加串话因子FOXO1的表达，同时部分抑制两条通路的下游脂肪转录因子PPARγ，C/EBPα，合成因子GPAT、DGAT、转运因子FAT/CD36的表达，部分提高分解因子HSL、ATGL的表达，从而促进细胞增殖，浓度依赖性的抑制脂肪细胞的分化过程中脂肪细胞内脂质集聚，改善脂质稳态。综上，该方可能通过干预IGF-1和SIRT1双通路及通路上串话因子FOXO1改善脂质代谢，为中医药防控肥胖病提供新的思路。