脾脏巨噬细胞条件培养基促进肝Kupffer细胞、星状细胞相互作用的分子机制

门静脉高压症（PH）时脾脏与肝纤维化肝硬化的关系已逐渐引起人们的关注，但目前尚缺乏有关脾脏对肝纤维化影响的系统深入研究。我们曾对肝Kupffer细胞（KC）和星状细胞（HSC）进行共培养，以脾脏巨噬细胞条件培养基（MφCM-L）作为刺激因素，研究发现脾脏巨噬细胞条件培养基对Kupffer细胞和星状细胞活化具有促进作用，但详细的分子机制还有待阐明。本课题首先采用蛋白抗体芯片检测脾脏巨噬细胞在内毒素刺激后分泌细胞因子的变化；再次使用Kupffer细胞和星状细胞共培养模型，以脾脏MφCM-L作为刺激因素，对差异表达明显的细胞因子功能通过正反两方面验证并比较其活化效能；选取活化效能较强的差异细胞因子，对其作用于Kupffer细胞和星状细胞表面的靶分子进行识别及鉴定。旨在进一步探讨脾脏促进肝纤维化的机制，进而为临床上开发从脾脏入手防治肝纤维化的方法提供新的思路与靶点。

门静脉高压症（PH）时脾脏与肝纤维化肝硬化的关系已逐渐引起人们的关注，但目前尚缺乏有关脾脏对肝纤维化影响的系统深入研究。我们曾对肝Kupffer细胞（KC）和星状细胞（HSC）进行共培养，以脾脏巨噬细胞条件培养基（MφCM-L）作为刺激因素，研究发现脾脏巨噬细胞条件培养基对Kupffer细胞和星状细胞活化具有促进作用，但详细的分子机制还有待阐明。为此本课题在前期工作基础上，以TNF-α、IL-8为指标进一步对活化HSC的作用进行了确认；使用蛋白抗体芯片检测了脾脏巨噬细胞在内毒素刺激后分泌细胞因子的变化，并用生物信息学方法对差异因子进行了筛选；使用Kupffer细胞和星状细胞共培养模型，通过调节培养液中细胞因子浓度的方式，对表达差异明显的细胞因子对HSC的活化效能进行评价。结果显示：MφCM-L可有效活化HSC，TNF-α、IL-8表达明显增加；与普通培养液相比，MφCM-L中细胞因子发生了明显变化，并且差异因子间存在一定关联性，IL-5和TGFβ2可能是其中比较关键的因子。以上结果为进一步探讨脾脏促进肝纤维化的机制，进而为临床上开发从脾脏入手防治肝纤维化的方法提供新的思路与靶点。