从HPA轴和PI3K-AKT通路探讨补肾法拮抗慢性阻塞性肺疾病气道炎症的“扶正”机制

补肾法是中医防治慢性阻塞性肺疾病（COPD）的重要治则。研究证实，补肾法可拮抗COPD气道炎症。本课题组前期发现，补肾防喘片的补肾组分淫羊藿苷可保护机体内在抗炎系统（HPA轴），促进糖皮质激素分泌，在整体水平"扶正"抗炎。随后发现，淫羊藿苷可激活巨噬细胞内在抗炎通路（PI3K-AKT通路），促进磷酸化AKT表达，在细胞水平"扶正"抗炎。淫羊藿苷的上述"扶正"作用仅与该药的"个性"有关，还是多种补肾类药物的"共性"抗炎规律体现？值得深入探讨。本研究以COPD大鼠为体内模型，以烟草提取物刺激肺泡巨噬细胞为体外模型，分别以补肾防喘片4种补肾组分（淫羊藿苷、补骨脂素、薯蓣皂苷元、地黄梓醇）干预，设清热解毒对照，运用酶联免疫、实时聚合酶链反应和蛋白印迹等技术，观察上述各组分对HPA轴和PI3K-AKT通路的影响。本项目通过探讨多种补肾类药物的"共性"抗炎规律，部分阐释补肾法"扶正"抗炎的理论内涵。

补肾防喘片是我科沈自尹院士研制的用于防治COPD和哮喘的中成药。本团队前期开展了一些补肾防喘片治疗COPD的临床观察及机理研究，然而其防治COPD尚缺乏循证医学证据支持，其药效物质基础和作用机理研究有待于深入。.我们开展的多中心临床研究发现，补肾防喘片治疗6个月（109例），与安慰剂（113例）比较，可改善COPD患者肺功能VC, FEV1 (%) and FEV1/FVC (%)等指标。与安慰剂比较，补肾防喘片可显著减少COPD急性发作次数和BODE指数，增加6分钟步行距离（6MWD）及SGRQ评分。与此同时，补肾防喘片可显著降低COPD患者血中的致炎因子IL-8和IL-17水平，增加抗炎因子IL-10和皮质醇（HPA轴终末产物）的水平。补肾防喘片组未见明显不良反应。.淫羊藿是补肾防喘片的君药，淫羊藿苷是其主要活性成分。吸烟是COPD的重要危险因素。我们开展的体内实验研究发现，淫羊藿苷(25, 50 and 100 mg/kg)可改善吸烟引起的小鼠肺功能下降，减轻肺部炎症细胞浸润，降低血清和肺泡灌洗液（BALF）中IL-8、TNF-α和MMP-9的分泌；体外实验发现，淫羊藿苷(10, 50 and 100 µM)可抑制香烟烟雾提取物（CSE）诱导的肺泡II型上皮细胞株（A549）IL-8和TNF-α分泌。接下来的研究发现，淫羊藿苷的抗气道炎症作用与抑制NF-KB通路的活化，上调糖皮质激素受体（GR）表达有关。我们还发现，清热组分黄芩苷对COPD模型的气道炎症和肺功能也显示了一定的改善作用。与补肾组分淫羊藿苷不同，黄芩苷对GR的表达无明显作用。.淫羊藿苷口服后在肝脏中可代谢为淫羊藿素。我们开展的实验研究发现，淫羊藿素是一种新型抗氧化剂，对于CSE诱导的肺泡II型上皮细胞损伤具有保护作用，可为COPD的抗氧化治疗提供新选择。机理研究发现，淫羊藿素可通过激活细胞固有的抗氧化通路，发挥抗氧化应激作用。具体而言，淫羊藿素可激活PI3K-Akt通路，增加Nrf2核转位，继而启动GCL基因转并最终增加GSH水平从而减少活性氧（ROS）的释放。.综上所述，我们从多中心临床研究、动物实验和体外研究多个方面确认了补肾防喘片及其组分防治COPD的疗效，并从整体水平（HPA轴）和细胞分子水平（AKT/Nrf2和HDAC2/GR）部分阐释了补肾防喘片“扶正”抗炎的内涵。