灰树花子实体蛋白可控酶解产生抗氧化活性肽的研究

As a kind of medical and edible mushroom, Grifola frondosa has a high nutritional value. Widely researches and great progress have been made in polysacchrides from G. frondosa, however, the active peptides from protein hydrolysate of G. frondosa have been seldom reported. Based on our previous studies, the crucial condition of enzyme-hydrolysis to protein of G. frondosa will be optimized in order to increase the extraction rate and obtain the active peptides, separation, structure analysis and determination of antioxidant activity of peptides from G. frondosa will be studied. Various experiments will be conducted to explain antioxidant activity mechanism of peptides from G. frondosa, including the antioxidant activity measurement in vitro, cell models and animal subaccute aging model. This study focuses on development of bioactive peptides and discussion to application of peptides from G. frondosa on functional foods or medicine. The project contributes to develop the new products of edible mushroom and promote the expansion of mushroom industry.

灰树花是一种药食兼用真菌，具有很高的营养保健价值，目前有关灰树花多糖的研究已经非常深入并取得了很多重大突破，而利用灰树花子实体蛋白制备生物活性肽的研究还未见报道。本项目以灰树花子实体蛋白为原料，在申请人已有研究基础上，研究内肽酶的可控酶解条件关键技术，以获得最大得率和生物活性的多肽酶解液，跟踪检测其抗氧化活性，筛选和分离出高活性灰树花多肽，探明其特异氨基酸序列结构，并通过多种体外抗氧化活性检测体系和细胞模型、亚急性衰老动物模型深入探讨其抗氧化机理，为开发食品源的生物活性多肽及探索其在功能食品或医学上的应用奠定理论基础。本项目的完成对于丰富生物活性肽的理论、拓展生物活性肽的来源、扩大食用菌新产品的开发和促进食用菌产业的发展都具有重要的意义。

食物蛋白经酶解后制得长短不一的肽，往往可提高功能特性、营养特性及生物活性。蛋白质是灰树花的主要成分之一，也是灰树花制取多糖后主要的副产物，而目前对于灰树花蛋白的研究工作甚少，利用灰树花蛋白制取生物活性肽更是一项空白。针对这一问题，本项目结合前期研究基础上，开展了以下几项研究工作: （1）通过单因素实验和正交优化实验获得了同时制备灰树花子实体多糖和蛋白的工艺；（2）完成了蛋白水解酶的筛选和灰树花蛋白可控酶解工艺的优化；（3）测定了灰树花蛋白胰蛋白酶水解物的组成成分，探讨了美拉德反应对提高灰树花多肽抗氧化活性的影响；（4）应用多种体外抗氧化活性评价方法评价了灰树花多肽组分的抗氧化活性；（5）对灰树花多肽进分离纯化，得到一条高抗氧化活性、高纯度的肽段，并鉴定了其分子结构；（6）利用D-半乳糖诱导小鼠亚急性氧化损伤模型研究了灰树花多肽的体内抗氧化活性。. 项目研究结果将为开发食品源的生物活性多肽及探索其在功能食品或医学上的应用奠定理论基础，并对于丰富生物活性肽的理论、拓展生物活性肽的来源、扩大食用菌新产品的开发和促进食用菌产业的发展都具有重要的指导意义。. 本课题自2013年1月起,至2015年12月资助期满。项目资助期间，课题负责人及项目组成员严格按照项目合同任务要求，合理安排项目进度，完成了项目规定的各项任务和指标，达到了预期研究目标。在此期间，参加国内学术会议2次，参加国际学术会议1次。相关研究成果发表SCI收录论文1篇，中文核心期刊论文2篇。