miR-125a/b与乳腺癌的关系研究

乳腺癌是最常见的恶性肿瘤之一，其microRNA表达图谱能够真实的反映疾病的状态。我们发现miR-125a/b与乳腺癌密切相关。本研究结合小RNA靶基因预测系统和大量文献搜索获得16个miR-125a/b候选靶基因，均为乳腺癌发病通路中重要的调控因子。本项目拟验证miR-125a/b的乳腺癌相关靶基因，还将在200例以上乳腺癌患者肿瘤组织中分析miR-125a-5p，miR-125a-3p和miR-125b以及其靶基因的表达水平，分析它们与患者病理类型、细胞学分级、ER/PR/Her-2和腋淋巴结转移等的相关性。从DNA的多态性、小RNA的表达以及靶基因的蛋白水平，多层次、多角度进行分析，建立以miR-125a/b为中心，多个靶基因共同参与调控的乳腺癌发生的分子网络，深入探求miR-125a/b分子通路与乳腺癌密切相关的分子机制，并探讨其作为生物标记在临床早期诊断和治疗方案中的可能性。

乳腺癌是危害女性健康的第一大恶性肿瘤, 其发病率在世界范围内呈逐年递增趋势。乳腺癌的发生和转移分子机制复杂,该领域一直为研究热点。microRNA是一种单链非编码小RNA，它在多种恶性肿瘤中的异常表达是癌症发生的重要机制之一。miR-125a的突变与乳腺癌的发病有很高的相关性，它的点突变会导致细胞中成熟miR-125a表达水平降低，从而调控靶基因的翻译抑制能力下降，影响乳腺癌的转移、入侵能力。.用荧光定量方法检测mir-125a/b在5种乳腺癌细胞及143份乳腺癌患者的癌组织和癌旁组织中的表达，发现miR-125a/b在MDA-MB-231、MDA-MB-453、Hs578T、T47D和MCF-7中的表达量都是极低的。在癌组织中，miR-125a-5p和miR-125b的表达显著低于癌旁组织，且miR-125a-5p的表达量随年龄的增加而减少，揭示miR-125a-5p可能与乳腺癌的发展过程相关。.为了探求miR-125a/b分子通路与乳腺癌密切相关的分子机制，我们根据microRNA的靶标数据库和大量文献搜索获得mir-125a/b的可能性靶基因STAT3和CDH5。我们用双荧光素酶报告系统分析了mir-125a/b与STAT3-3’utr，mir-125a/b与CDH5-3’utr的靶向性，结果显示两者的作用都约为2倍，提示mir-125a/b能负向调节STAT3和CDH5。.为了寻找乳腺癌临床诊断的生物标记，我们检索了乳腺癌中异常表达的microRNA，其中miR-200家族在很多癌症中被证实跟迁移相关。我们检测了miR-200家族所有成员在101份乳腺癌样本中的表达情况，并结合患者的临床病理特征进行了分析。相对于癌旁组织的表达，miR-200a/b/c在癌组织中表达显著降低，所有成员的表达量都随淋巴结数目的增多而显著减少。该研究表明miR-200家族在乳腺癌迁移过程中起肿瘤抑制的作用，miR-200b在肿瘤组织中表达量的减少可以作为区分乳腺癌迁移与否的一个指标。.由于人体的许多表型差异及肿瘤的发生过程等，都可能与SNP有关。因此，我们通过结合SNP数据库、miRNA数据库以及大量文献查找了乳腺癌相关microRNA的SNP位点，针对这些位点设计引物，对乳腺癌样本进行了PCR扩增和测序以及荧光定量后HRM高分辨率熔解曲线分析，结果都未能找到与乳腺癌疾病相关的S