辛通畅络法对FSGS肾小球毛细血管损伤修复作用的机制研究

本课题是既往国家自然基金项目基础上的纵深研究。前期结果已证实辛通畅络法中药复方对肾小球毛细血管重构，促进早期肾小球硬化逆转，具有肯定作用。本研究拟从"调控相关血管因子及其受体协调表达，促进毛细血管再生与成熟，实现肾小球毛细血管丛重构"这一全新视角，采用药物干预FSGS模型大鼠动物实验，创新性结合体视学、3D追踪等高新技术，多角度探索辛通畅络法复方"肾苏Ⅲ"促肾小球毛细血管再生与成熟的有效性；多层次利用足细胞、内皮细胞单培养和细胞共培养-两室弥散体系，观察对作用靶点VEGF/VEGFR-2、Ang1,2/Tie-2调控作用，分析对损毁肾小球毛细血管再生与成熟的作用机理。进一步阐明本法对早期肾小球硬化毛细血管重构的干预机制，证实"辛通畅络法可促FSGS肾小球毛细血管再生与成熟，其机制与调控VEGF/VEGFR-2、Ang-1,2/Tie-2协调表达有关"假说，为肾小球硬化早期防治提供科学依据。

本课题是我们在既往完成的国家自然科学基金资助项目“疏利少阳、标本兼治法对IgA 肾病相关作用机理的研究”（项目编号：30472129）、“肾络宁阻抑局灶节段性肾小球硬化促进毛细血管重构的机制研究” （项目编号：30772808）以及天津市自然科学基金项目“中药肾疏宁对肾小球硬化影响的实验研究”（项目编号：023611511）的基础上的进一步深化研究。 . 前期研究已从临床观察与基础研究两个方面证实“辛通畅络”法系列中药复方对于CKD，以及肾小球硬化治疗的有效性。本实验通过网络药理学对肾苏Ⅲ进行药物有效成分分析及作用通路、作用靶点预测；通过动物在体实验、细胞离体实验，运用体视学、微结构3D图像复原等技术进行定量测量，动态观察肾小球成熟与新生毛细血管的走行分布、体积、表面积及长度；利用组织学、分子生物学、病理学、免疫学等多领域先进检测方法实现肾小球VEGF、Ang-1与Ang-2表达的动态定量检测。于体外细胞实验，通过脏层上皮细胞与血管内皮细胞单培养及共同组成的细胞共培养—两室弥散体系，利用细胞生物学、分子生物学技术观察细胞增殖与VEGF/VEGFR-2、Ang-1,Ang-2/Tie-2表达改变。证实了肾苏Ⅲ通过调控血管内皮生长因子及其受体、调节血管内皮生长素及酪氨酸受体激酶多条通路的表达，修复受损肾小球毛细血管，减少细胞炎症因子及基质的生成，改善肾小球通透性，减少蛋白尿、改善血浆白蛋白、血脂水平，从而保护肾功能，延缓肾脏病理进展。