孕妇外周血液中胎儿DNA甲基化高通量检测方法的研究

设计一组带有缺口的环状分子探针用于甲基化位点的检测。当目标分子中CG位点存在甲基化的时候，甲基化探针可以准确的识别并且与之结合形成环状分子，并且能够在PCR扩增中进行荧光分子的标记；而当目标分子中的CG位点没有被甲基化修饰的时候，就会被酶切消化去除或者在非甲基化探针分子存在的情况下与之准确的识别成环，在进一步PCR扩增中标记上另一种荧光分子。当甲基化探针和非甲基化探针同时存在的时候，某甲基化位点甲基化程度的高低就可以被定量的分析。所有这些反应过程均在一种特殊的反应介质乳液体系中完成，这不但保证了反应的敏感性和特异性，而且体系中特殊的结构还具有高通量检测能力。通过对不同妊娠时期和不同妊娠状态下孕妇外周血液样品中甲基化的检测分析，为遗传病的产前筛查和诊断提供了新的检测方法和手段。本课题研究在分子遗传学、分子生物学、功能基因组学及生物医药领域具有广泛的应用价值。